Anti-Cytokeratin 7 (KRT7) Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, IF-P, ELISA – P08729

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Keratin 7 (Cytokeratin 7/KRT7)

• Keratin 7 (KRT7), auch bekannt als Cytokeratin-7 (CK-7), Sarcolektin oder Typ-II-Keratin Kb7, ist ein Mitglied der Typ-II-Keratin-Familie, die intermediäre Filament-Zytoskelettnetzwerke bildet, die für die strukturelle Integrität von Epithelzellen unerlässlich sind.
• KRT7 paart sich mit Typ-I-Keratinen (z. B. KRT19) zur Assemblierung von Heterodimeren, die zu 10 nm großen intermediären Filamenten polymerisieren. Dies erhält die zytoplasmatische Architektur und mechanische Belastbarkeit in einfachen und drüsigen Epithelien.
• Unkonventionell blockiert KRT7 die interferonabhängige Interphase und stimuliert die DNA-Synthese, was auf eine regulatorische Rolle beim Zellzyklusfortschritt jenseits der zytoskelettalen Funktionen hindeutet.
• KRT7 ist an der Translationsregulation der E7-mRNA des humanen Papillomavirus Typ 16 (HPV16) beteiligt, was es in Wirt-Virus-Interaktionen und onkogene Signalwege einbindet.
• Das Protein ist überwiegend im Zytoplasma lokalisiert (UniProt: P08729), was mit seinen strukturellen und nicht-kanonischen zytoplasmatischen Aktivitäten übereinstimmt.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität, Filamentassemblierung und Proteininteraktionen modifizieren können; es ist außerdem ein Glykoprotein und enthält Isopeptidbindungen.
• Die Gewebeexpression ist eingeschränkt: KRT7 wird in kultivierten epidermalen, bronchialen und mesothelialen Zellen sowie in Drüsenzellen der gastroösophagealen Verbindung beobachtet, fehlt aber in Dickdarm, Ektozervix, Leber und Speiseröhre, was es zu einem nützlichen Herkunftsmarker macht.
• Zusätzliche Schlüsselwörter: intermediäres Filament, Spiralwicklung (coiled coil), Wirt-Virus-Interaktion, Proteomik-Identifizierung, Referenzproteom und Ubl-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über die Aminosäuren 230–469 des menschlichen KRT7 (NP_005547.3) und zielt auf eine interne Region des Proteins ab; dieses Design kann die Detektion von vollständigtem KRT7 unter denaturierenden Western-Blot-Bedingungen erleichtern.
• Für den Western Blot (WB) ist eine Bande um 51 kDa zu erwarten; verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. Lysate von Epithelzelllinien, von denen bekannt ist, dass sie KRT7 exprimieren) und Negativkontrollen (z. B. Dickdarm- oder Lebergewebe, die KRT7 nicht enthalten).
• Bei der Immunfluoreszenz (IF-P) optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um die Struktur der zytoplasmatischen intermediären Filamente zu erhalten; eine Co-Färbung mit einem Kernfarbstoff (z. B. DAPI) kann die subzelluläre Lokalisation bestätigen.
• Es wurde gezeigt, dass der Antikörper mit Maus- und Ratten-KRT7-Orthologen kreuzreagiert; dennoch sollte die Sequenzhomologie überprüft werden, und eine Validierung bei der interessierenden Spezies wird empfohlen.
• Für ELISA kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Detektionsantikörper oder verwenden Sie ihn als Fangreagenz; Titrationsexperimente werden empfohlen, um die optimalen Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.

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