Kaninchen-polyklonaler Antikörper gegen Anti-Zytokeratin 20 (KRT20) für WB, IF/ICC, ELISA – P35900

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Zytokeratin 20 (KRT20)

• Keratin, Typ I, zytoskelettal 20 (KRT20), auch bekannt als Zytokeratin-20 (CK-20), Keratin-20 (K20) oder Protein IT, ist ein Intermediärfilamentprotein des Keratins vom Typ I.
• Es spielt eine bedeutende Rolle bei der Aufrechterhaltung der Organisation von Keratinfilamenten im Darmepithel. Bei Phosphorylierung ist KRT20 an der Muzinsekretion im Dünndarm beteiligt (aufgrund von Homologie).
• Die subzelluläre Lokalisation ist zytoplasmatisch, was mit seiner Funktion als Bestandteil des Zytoskeletts übereinstimmt.
• Es wird überwiegend im Darmepithel exprimiert, mit einer spezifischen Lokalisation in den Luminalzellen der Kolonschleimhaut. Zusätzlich wird es in Merkel-Zellen der keratinisierten Mundschleimhaut exprimiert, einschließlich der gingivalen Reteleisten, der basalen Schicht des Gaumens und der lingualen Geschmacksknospen.
• Gemäß den UniProt-Schlüsselwörtern wird es folgenden Kategorien zugeordnet: Apoptose, Coiled-Coil, Zytoplasma, direkte Proteinsequenzierung, Intermediärfilament, Keratin, Phosphoprotein, Identifizierung mittels Proteomik, Referenzproteom.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von ungefähr 48.487 Da (UniProt), wandert jedoch in der SDS-PAGE bei etwa 48 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem zentralen Abschnitt des humanen KRT20 (AS 245–424), der bei der Maus konserviert ist; die Kreuzreaktivität mit der Maus wurde validiert. Vor der Verwendung sollte für andere Spezies ein Sequenzabgleich in Betracht gezogen werden.
• Beim Western-Blotting wird eine Bande bei etwa 48 kDa erwartet. Optimieren Sie die Blockierung und die Antikörperverdünnung mit einem geeigneten Zelllysat, beispielsweise aus intestinalen Caco-2- oder HT-29-Zellen.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollten die Bedingungen für Fixierung und Permeabilisierung getestet werden; validieren Sie die nukleäre gegenüber der zytoplasmatischen Färbung in intestinalen Zelllinien.
• Verwenden Sie für den ELISA rekombinantes KRT20 oder ein spezifisches Peptid als Beschichtungsantigen; führen Sie eine Titration durch, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargenkonsistenz für die vorgesehenen Anwendungen überprüft werden.

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