Anti-Cytokeratin 14 (KRT14) Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IHC-P, ELISA - P02533

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Cytokeratin 14

• KRT14 ist ein Typ-I-Intermediärfilament-Protein, das für das strukturelle Gerüst der basalen Keratinozyten unerlässlich ist. Es bildet obligate Heteropolymere mit KRT5 und etabliert ein widerstandsfähiges zytoskelettales Netzwerk, das der Epidermis und anderen geschichteten Epithelien mechanische Festigkeit verleiht. Verwandte Referenzen: PMID:11724817, PMID:1694855, PMID:1720261

• Die nicht-helikale Domäne am Ende von KRT14 fördert die Selbstorganisation von KRT5-KRT14-Filamenten zu großen Bündeln und verbessert so die Widerstandsfähigkeit der Filamente in vitro. Verwandte Referenzen: PMID:11724817

• KRT14 ist primär im Zytoplasma lokalisiert, kann sich aber auch im Kern befinden. Es wird stark in der Basalschicht der geschichteten Epithelien exprimiert, einschließlich der Epidermis, des Hornhautepithels und der äußeren Wurzelscheide der Haarfollikel, wobei die Expression in den suprabasalen Schichten abnimmt.

• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Disulfidbrückenbildung und Ubiquitinierung können die Dynamik und Stabilität der KRT14-Filamente regulieren.

• Pathogene Varianten in KRT14 sind mit Hautfragilitätssyndromen wie der Epidermolysis bullosa simplex (EBS) und ektodermalen Dysplasien verbunden, was seine wesentliche Rolle für die Integrität des Epithels unterstreicht.

• Die Expression von KRT14 ist stark gewebsspezifisch: Sie ist in basalen Keratinozyten und im umgebenden Stabhaar während der Telogenphase vorhanden, fehlt jedoch im Stratum corneum und in der inneren Wurzelscheide.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die zentrale Stabdomäne von humanem KRT14 (aa 264-457); aufgrund der hohen Homologie wird erwartet, dass der Antikörper mit Maus- und Ratten-KRT14 kreuzreagiert, wie vom Anbieter angegeben. Validieren Sie dies immer in der entsprechenden Spezies/dem entsprechenden Gewebe.

• Für Western Blot wird eine Bande bei ~52 kDa erwartet; Optimieren Sie die Beladung und die Antikörperverdünnung für eine klare Detektion in Lysaten aus keratinozytenreichen Geweben (z. B. Haut, Mundschleimhaut).

• Für IHC-P verwenden Sie formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Schnitte; eine Antigen-Retrieval kann erforderlich sein. KRT14-Färbung markiert Basalzellen; erwarten Sie ein positives Signal in der Basalschicht der Epidermis und anderer geschichteter Epithelien.

• Verwenden Sie bei ELISA-Anwendungen gereinigtes rekombinantes KRT14-Protein als Standard und validieren Sie mit bekannten positiven/negativen Proben.

• Da KRT14 Komplexe mit KRT5 bildet, sollten Sie Co-Immunopräzipitationsexperimente in Betracht ziehen, um die Assemblierung von Keratinfilamenten zu untersuchen.

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