Anti-Cytokeratin 14 (KRT14) Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Cytokeratin 14

• Keratin, Typ I zytoskelettales 14 (KRT14), auch bezeichnet als Cytokeratin-14 (CK-14) und Keratin-14 (K14), ist ein Mitglied der Typ-I-Keratin-Familie der Zwischenfilamentproteine.
• KRT14 bildet obligate Heteropolymere mit dem Typ-II-Keratin KRT5 und trägt zum Keratin-Zwischenfilamentnetzwerk bei, das der Basalschicht der Epidermis und anderen geschichteten Epithelien mechanische Festigkeit und strukturelle Integrität verleiht. Verwandte Referenzen: PMID:11724817 PMID:1694855 PMID:1720261
• Die nichthelikale Schwanzdomäne von KRT14 fördert die Selbstorganisation von KRT5-KRT14-Filamenten zu großen Bündeln und erhöht die mechanische Belastbarkeit von Keratin-Zwischenfilamenten in vitro. Verwandte Referenzen: PMID:11724817
• Subzellulär lokalisiert sich KRT14 sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was mit seiner Rolle bei der Erhaltung der Zytoskelettarchitektur und potenziellen nuklearen Funktionen übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression ist prominent in den basalen Keratinozyten geschichteter Epithelien: nachweisbar im Hornhautepithel, der basalen Epidermisschicht und der äußeren Wurzelscheide von Anagen-Haarfollikeln, aber abwesend in terminal differenzierten suprabasalen Schichten wie dem Stratum corneum.
• Genetische Variationen in KRT14 sind mit mehreren erblichen Hautfragilitätserkrankungen verbunden, darunter Epidermolysis bullosa simplex, ektodermale Dysplasie und Palmoplantarkeratodermie.
• Das Protein erfährt posttranslationale Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung und enthält Coiled-Coil-Domänen und Disulfidbindungen, die für die Filamentassemblierung und -stabilität essenziell sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 371-470 innerhalb der C-terminalen nichthelikalen Schwanzdomäne; der Antikörper kann bevorzugt Epitope in dieser Region erkennen, die für die Filamentbündelung und mechanische Belastbarkeit kritisch sind.
• Für den Western Blot ist eine Bande nahe 52 kDa in Keratinozytenlysaten zu erwarten; validieren Sie die Bandenidentifizierung mit positiven Kontrollen (z. B. HaCaT-Zelllysat) und beachten Sie, dass posttranslationale Modifikationen leichte Wanderungsverschiebungen verursachen können.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) und Immunfluoreszenz ist eine starke zytoplasmatische und nukleäre Färbung in basalen Epithelzellen zu erwarten; Haut-, Hornhaut- oder orale Mukosaschnitte sind geeignete positives Kontrollgewebe.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte deutet auf konservierte Epitope hin; jedoch wird für die Verwendung bei anderen Arten oder Anwendungen, die hohe Spezifität erfordern, eine Sequenzausrichtung der Immunogenregion empfohlen.
• Als polyklonaler Antikörper kann die Charge-to-Charge-Konsistenz variieren; validieren Sie jede neue Charge in Ihrem Assaysystem, insbesondere für quantitative Anwendungen wie ELISA.
• Für ELISA kann das synthetische Peptid-Immunogen als Beschichtungsantigen für die Antikörpertitration oder als positive Kontrolle zur Bewertung der plattengebundenen Aktivität verwendet werden.

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