Anti-Cytokeratin 12 (KRT12) Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q99456

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Cytokeratin 12 (KRT12)

• Kodiert ein Typ-I-Keratin-Zwischenfilamentprotein, Keratin 12 (K12), das sich mit dem Typ-II-Keratin KRT3 paart, um heteropolymere Filamente im Hornhautepithel zu bilden.
• Es ist essenziell für die Bereitstellung mechanischer Festigkeit und struktureller Integrität der Hornhautepithelschicht und schützt dadurch die Augenoberfläche.
• Die Expression ist auf das Hornhautepithel beschränkt, was auf Proteinebene bestätigt wurde, was es zu einem zuverlässigen Marker für Hornhautepithelzellen macht.
• Mutationen in KRT12 sind mit der Meesmannschen Hornhautdystrophie (MECD1) verbunden, einer autosomal-dominanten Erkrankung, die durch Mikrozysten im Hornhautepithel charakterisiert ist.
• Gehört zur Keratin-Familie der Zwischenfilament-Gene, die kritisch für die Zytoarchitektur und Belastbarkeit von Epithelgeweben sind.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen und wurde durch direkte Proteinsequenzierung und massenspektrometriebasierte Proteomik identifiziert.
• Das von UniProt vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 53,5 kDa (53511 Da), was mit der beobachteten Produktmasse von 54 kDa übereinstimmt.
• Als Zwischenfilamentprotein lokalisiert sich KRT12 überwiegend im Zytoplasma von Hornhautepithelzellen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (AA 295-494) des humanen KRT12 und umfasst einen Teil der Stäbchen- und Schwanzdomänen. Diese Region kann Spezifität gegenüber anderen Keratinen verleihen; die Spezifität sollte mit rekombinanten Proteinen oder geeigneten Kontrollen bestätigt werden.
• Für den Western Blot ist eine Bande bei etwa 54 kDa zu erwarten. Verwenden Sie positive Kontrolllysate aus humanen Hornhautepithelzellen oder Gewebeextrakten. Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf eine potenzielle Eignung für Hornhautstudien an Nagetieren hin, eine Validierung in diesen Spezies wird jedoch empfohlen.
• Im ELISA kann der Antikörper für den direkten oder indirekten Nachweis verwendet werden. Optimieren Sie Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnung experimentell. Bei der Entwicklung eines Sandwich-ELISA kann die Paarung mit einem KRT12-spezifischen Fangantikörper die Leistung verbessern.
• Als polyklonaler Antikörper ist eine Charge-zu-Charge-Variabilität möglich. Eine konsistente Leistung sollte mit standardisierten Protokollen und internen Kontrollen überprüft werden.
• Anwendungen außerhalb von WB und ELISA (z. B. Immunfluoreszenz, Immunhistochemie) sind nicht in den Spezifikationen aufgeführt und erfordern eine gründliche Validierung durch den Endanwender.

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