Anti-Cytokeratin 1 (KRT1) Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P04264

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Cytokeratin 1 (KRT1) Funktion und Lokalisierung

• Keratin, Typ II zytoskelettal 1 (KRT1), auch bezeichnet als Cytokeratin-1 (CK-1) oder 67 kDa Cytokeratin, ist ein Typ II Intermediärfilament-Protein, das beim Menschen durch das KRT1-Gen kodiert wird.
• Als strukturelle Komponente von Intermediärfilamenten bildet KRT1 Heteropolymere mit Typ I Keratinen, die differenzierenden suprabasalen Keratinozyten geschichteter Epithelien mechanische Festigkeit und Stabilität verleihen. Verwandte Referenzen: PMID:1381288
• Durch Wechselwirkungen mit Integrin beta-1 (ITB1) und Rezeptor der aktivierten Proteinkinase C 1 (RACK1) kann KRT1 die Aktivität von Kinasen wie PKC und SRC regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:17956333
• Im Komplex mit C1QBP dient KRT1 als hochaffiner Rezeptor für Kininogen-1 (HMWK) und verknüpft so Intermediärfilamente mit der Zellsignalgebung. Verwandte Referenzen: PMID:21544310
• Subzellulär lokalisiert KRT1 sowohl im Zytoplasma als auch in der Zellmembran, was mit seinen strukturellen und Rezeptor-Funktionen übereinstimmt.
• KRT1 wird hauptsächlich im terminal differenzierenden Epidermis exprimiert; die Proteinquelle für die Charakterisierung ist oft neonatale Vorhaut.
• Dieses Keratin unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Methylierung und Citrullinierung, und ist bei Mutation mit Hauterkrankungen wie Ichthyose und palmoplantarer Keratodermie assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 545–644 in der C-terminalen Region von humanem KRT1 umfasst. Diese Region ist wahrscheinlich in assemblierten Filamenten oberflächenexponiert, wodurch der Antikörper unter geeigneten Bedingungen für den Nachweis von sowohl denaturiertem als auch nativem KRT1 geeignet ist.
• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von KRT1 ungefähr 66 kDa. Verwenden Sie geeignete Reduktionsmittel und Denaturierungsschritte; validieren Sie die Detektion in Ihren spezifischen Zell- oder Gewebelysaten, da die Keratinextraktion möglicherweise Puffer mit hohem Salz- oder Harnstoffgehalt erfordert.
• Bei der Immunfluoreszenz an Paraffin-eingebetteten Schnitten (IF‑P) ist eine Antigen-Retrieval unerlässlich. Ein Permeabilisierungsschritt kann die Zugänglichkeit des intrazellulären Targets verbessern. Bestätigen Sie die Reaktivität mit Human-, Maus- oder Rattenhautproben.
• Für ELISA koppeln Sie diesen monoklonalen Antikörper mit einem geeigneten Typ I Keratin-Nachweisantikörper, wenn Sie einen Sandwich-Immunoassay entwickeln. Titrieren Sie sowohl Capture- als auch Detektionsreagenzien in Ihrem Assaysystem.
• Da Kreuzreaktivität für Human, Maus und Ratte angegeben ist, ziehen Sie ein Sequenzalignment der Immunogenregion in Betracht, um die Epitop-Konservierung zu überprüfen, und verwenden Sie spezies-spezifische Kontrollen.

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