Anti-Cystatin C Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P01034

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Cystatin C Funktion und Lokalisierung

• Cystatin C (auch bekannt als Cystatin-3, Gamma-Trace, neuroendokrines basisches Polypeptid, Post-Gamma-Globulin) ist ein sezernierter Cystein-Protease-Inhibitor, der vom CST3-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als potenter Inhibitor von lysosomalen Cystein-Proteinasen (Cathepsine B, H, L, S) und extrazellulären papainähnlichen Enzymen und reguliert die proteolytische Aktivität in verschiedenen biologischen Flüssigkeiten.
• Gehört zur Cystatin-Superfamilie (Typ-2-Cystatine) und teilt eine konservierte Cystatin-Faltung mit Disulfidbrücken, die für die strukturelle Stabilität entscheidend sind.
• Überwiegend im extrazellulären Raum lokalisiert; es wird sezerniert und in hohen Konzentrationen in der Zerebrospinalflüssigkeit, im Plasma und in anderen Körperflüssigkeiten gefunden.
• Zeigt gewebsspezifische Expression: am höchsten im Nebenhoden, im Vas deferens, im Gehirn, im Thymus und im Eierstock; niedriger in der Glandula submandibularis; vorhanden im submandibulären und sublingualen Speichel, aber fehlend im Parotisspeichel.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Spaltung des Signalpeptids, N-verknüpfte Glykosylierung und Phosphorylierung, was zu seiner funktionalen Vielfalt beiträgt.
• Beteiligt an mehreren Pathologien, einschließlich altersbedingter Makuladegeneration (ARMD11), zerebraler Amyloidangiopathie, hereditärer Cystatin C Amyloidangiopathie (HCCAA) und Leukodystrophie, oft unter Beteiligung der Bildung von Amyloidfibrillen.
• Diagnostische Bedeutung: Serum-Cystatin C-Spiegel werden als Marker für die Nierenfunktion verwendet, und seine Anwesenheit in Körperflüssigkeiten hilft bei der Überwachung von renalen und neurologischen Störungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für WB sollten Sie eine Positivkontrolle wie menschliches Serum oder Zerebrospinalflüssigkeit in Betracht ziehen, in der Cystatin C reichlich vorhanden ist; erwarten Sie unter reduzierenden Bedingungen eine Bande um 13 kDa für das reife Protein.
• Bei der Untersuchung von Mausproben sollten Sie zunächst die Kreuzreaktivität validieren, da der Antikörper sowohl humanes als auch murines Cystatin C erkennt; Mausniere oder -serum können als Positivkontrollen dienen.
• Für ELISA kann die Kombination dieses Fangantikörpers mit einem Detektionsantikörper unterschiedlicher Klonalität oder Epitoptopologie das Signal verstärken; optimieren Sie die Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen für natives sezerniertes Cystatin C.
• Sorgen Sie für eine gründliche Probenvorbereitung für Proteine mit niedrigem Molekulargewicht (≤15 kDa), indem Sie geeignete Membranporengrößen und Transferzeiten verwenden, um Verluste beim Western Blotting zu vermeiden.
• Erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem humanem Cystatin C als Standard und Positivkontrolle für quantitative Assays.

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