Anti-Cystatin B Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P04080

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Cystatin B

• Cystatin B (auch bekannt als Stefin-B, CPI-B oder Leber-Thiol-Proteinase-Inhibitor) ist ein intrazelluläres Protein, das zur Cystatin-Superfamilie der Cystein-Protease-Inhibitoren gehört.
• Es fungiert als fest bindender reversibler Inhibitor der Cathepsine L, H und B und reguliert so die Aktivität lysosomaler Cystein-Proteasen.
• Das Protein wird durch das CSTB-Gen (auch als CST6 oder STFB bezeichnet) kodiert und befindet sich auf menschlichem Chromosom 21.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst sowohl das Zytoplasma als auch den Zellkern, was seiner Rolle bei der Kontrolle der Proteolyse in mehreren Kompartimenten entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Azetylierung, und das Protein wurde durch direkte Proteinsequenzierung und Proteomics-Ansätze identifiziert.
• Mutationen im CSTB-Gen sind mit progressiver myoklonischer Epilepsie (EPM1), einer neurodegenerativen Störung, verbunden, was seine Rolle für die neuronale Funktion unterstreicht.
• Das reife Protein hat ein Molekulargewicht von ca. 11 kDa, wie durch Sequenzanalyse bestimmt wurde.
• Zusätzliche Schlüsselwörter, die mit Krankheitsvarianten verknüpft sind, umfassen Epilepsie und Neurodegeneration, was seine klinische Relevanz unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die N-terminale Region (Aminosäuren 1–98) des全长-humanen Cystatin B abdeckt, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich das native Protein erkennt.
• Für die Western-Blot-Analyse wird eine Bande um 11 kDa erwartet; erwägen Sie die Verwendung von 12–15 % SDS-PAGE-Gelen und optimierte Transferbedingungen für kleine Proteine.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Cystatin B wurde berichtet; eine Validierung im entsprechenden Probensystem wird empfohlen.
• Im ELISA sollten Beschichtungsantigen und Antikörperkonzentration titriert werden, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen; dieser Antikörper eignet sich sowohl für direkte als auch für Sandwich-ELISA-Formate.
• Da Cystatin B selbst ein Protease-Inhibitor ist, erfordert die Standard-Probenvorbereitung möglicherweise keine zusätzlichen Thiol-Protease-Inhibitoren, dies sollte jedoch experimentell bestätigt werden.

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