Anti-CYP46A1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9Y6A2

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CYP46A1

• CYP46A1 ist eine Cytochrom-P450-Monooxygenase, die als Cholesterin-24-Hydroxylase wirkt und eine Hauptrolle bei der Cholesterinhomöostase im Gehirn spielt: Sie katalysiert die Hydroxylierung an Position C-24 der Cholesterin-Seitenkette und fördert so den Cholesterinaustritt aus Neuronen. Zugehörige Referenzen: PMID:10377398 PMID:14640697 PMID:18621681
• Neben Cholesterin hydroxyliert sie verschiedene Cholesterinderivate und Steroidhormone sowohl am Ring als auch an der Seitenkette und wandelt sie in aktive Oxysterole um, die an Lipidsignalwegen und der Biosynthese beteiligt sind. Zugehörige Referenzen: PMID:12077124 PMID:14640697 PMID:28190002
• Wirkt als Epoxidase, indem sie Desmosterol zu (24S),25-Epoxycholesterin umwandelt – ein Ligand für die Kernrezeptoren NR1H2 und NR1H3, der nachweislich die Neurogenese im sich entwickelnden Gehirn fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:25017465
• Kann auch den oxidativen Metabolismus von Fremdstoffen wie Clotrimazol katalysieren. Zugehörige Referenzen: PMID:20667828
• Durch die Förderung des Cholesterinabaus kann CYP46A1 indirekt den Mevalonatweg aktivieren und die Synthese von neuem Cholesterin und nichtsteroidalen Isoprenoiden koordinieren, die an synaptischer Aktivität und Lernen beteiligt sind (nach Ähnlichkeit).
• Lokalisiert sich an der Membran des Endoplasmatischen Retikulums, der Mikrosomenmembran, präsynaptischen und postsynaptischen Regionen sowie dendritischen Fortsätzen.
• Die Expression ist gehirnspezifisch, mit höheren mRNA-Spiegeln in grauen Substanzbereichen; die Expression steigt linear mit dem Alter an und ist in fetalem Gewebe nicht nachweisbar.
• Schlüsselwörter: Häm, Eisen, Metallbindung, Monooxygenase, Oxidoreduktase, Sterolstoffwechsel, Cholesterinstoffwechsel, Synapse, Transmembran, Alternatives Spleißen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 24–280 und deckt einen großen N-terminalen Bereich des Proteins ab. Obwohl diese Region mit hoher Wahrscheinlichkeit Antikörper gegen das vollständige CYP46A1 generiert, empfehlt sich die Validierung der Reaktivität im jeweiligen Probensystem – insbesondere bei der Detektion potenzieller Isoformen oder Fragmente.
• Für das Western Blotting ist eine Bande bei ca. 57 kDa zu erwarten; verwenden Sie ein 10%iges SDS-PAGE-Gel und angepasste Transferbedingungen für diesen Molekulargewichtsbereich.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC: Da CYP46A1 ein integrales Membranprotein des ER ist, empfehlt sich eine milde Permeabilisierung mit Detergenzien wie 0,1 % Triton X‑100; eine Co-Färbung mit einem ER-Marker kann die Lokalisation bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz und optimieren Sie die Bedingungen mit einem bekannten Positivkontroll (z. B. rekombinantes CYP46A1-Protein oder Gewebslysat); die Kreuzreaktivität mit Orthologen aus Maus und Ratte unterstützt die Verwendung in Nagetiermodellen.

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