Anti-CYP2F1 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P24903

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CYP2F1-Funktion und Lokalisierung

• Cytochrom P450 2F1 (CYP2F1) ist ein Mitglied der Cytochrom-P450-Superfamilie der Monooxygenasen, die die Oxidation organischer Substanzen katalysieren und eine Schlüsselrolle im Metabolismus von Xenobiotika und endogenen Verbindungen spielen.
• Das Enzym könnte am Metabolismus verschiedener Pneumotoxine, einschließlich Naphthalin, beteiligt sein und ist in der Lage, Ethoxycumarin, Propoxycumarin und Pentoxyresorufin zu dealkylieren, zeigt jedoch keine Aktivität gegenüber Ethoxyresorufin und nur Spuren von Dearylierungsaktivität gegenüber Benzyloxyresorufin.
• CYP2F1 bioaktiviert 3-Methylindol (3MI) durch Dehydrierung zum mutmaßlichen Elektrophil 3-Methylen-indolenin, einer Verbindung, die mit Lungentoxizität in Verbindung gebracht wird.
• Dieses Protein ist in der Membran des endoplasmatischen Retikulums und der Mikrosomenmembran lokalisiert, was mit seiner Rolle im mikrosomalen Monooxygenase-System übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression erfolgt überwiegend in der Lunge, mit seltenem Nachweis in Leber und Plazenta, was seine spezialisierte Funktion im Stoffwechsel der Atemwege unterstreicht.
• CYP2F1 enthält eine Häm-Prosthetische Gruppe und einen Eisen-Kofaktor, die für seine katalytische Aktivität essentiell sind, und wird als Oxidoreduktase klassifiziert. Alternatives Spleißen des CYP2F1-Gens wurde beschrieben, was möglicherweise zu verschiedenen Isoformen führt.
• Das berechnete Molekulargewicht der kanonischen Isoform beträgt etwa 55,5 kDa, was mit dem beobachteten Band bei 56 kDa auf der SDS-PAGE übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 100–290 von humanem CYP2F1, einer Region, die wahrscheinlich innerhalb der cytoplasmatischen Domäne liegt und eine ausreichende Konservierung über Spezies hinweg aufweisen könnte, um die beobachtete Kreuzreaktivität mit Human, Maus und Ratte zu ermöglichen.
• Für den Western Blot kann eine typische Startverdünnung für polyklonale Antikörper untersucht werden (z.B. 1:500–1:2000), und der Assay sollte in einer Lungen-abstammenden Zelllinie oder einem Gewebelysat validiert werden, in dem CYP2F1-Expression erwartet wird.
• Bei IHC-P können Antigen-Retrieval-Methoden erforderlich sein (z.B. hitzeinduziertes Epitop-Retrieval bei pH 6 oder 9); geeignete Kontrollen wie Lungengewebeschnitte sollten einbezogen werden. Vorabtests mit verschiedenen Fixierungsprotokollen werden empfohlen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz in einem Sandwich-Format verwendet werden, jedoch sollte die Kreuzreaktivität mit anderen CYP-Familienmitgliedern aufgrund von Sequenzähnlichkeiten bewertet werden.
• Da CYP2F1 ein Membranprotein ist, sollte die Verwendung milder Detergenzien in Lysepuffern (z.B. 1% NP-40 oder Triton X-100) in Betracht gezogen werden, um eine ordnungsgemäße Solubilisierung sicherzustellen.

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