Anti-CYP27A1 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB und ELISA - Q02318

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CYP27A1 (Sterol-26-Hydroxylase)

• CYP27A1 kodiert eine mitochondriale Cytochrom-P450-Enzym, Sterol-26-Hydroxylase, die zur Familie CYP27 gehört.
• Es katalysiert die dreistufige Hydroxylierung von Cholesterin an der terminalen Methylgruppe und produziert 27-Hydroxycholesterin, ein kritisches Oxysterol.
  Verwandte Referenzen: PMID:12077124, PMID:21411718, PMID:28190002
• Durch diese Aktivität reguliert CYP27A1 das Cholesterin-Gleichgewicht (Homöostase), indem es die Gallensäuresynthese über die klassischen und alternativen Wege einleitet.
  Verwandte Referenzen: PMID:11412116, PMID:1708392, PMID:2019602
• Die resultierenden Oxysterole wirken als Liganden für Leber-X-Rezeptoren (LXRs) und modulieren die Transkription von Genen, die am Lipidstoffwechsel beteiligt sind.
  Verwandte Referenzen: PMID:12077124, PMID:9660774
• CYP27A1 ist auch am Stoffwechsel von 7-Ketocholesterin in der Netzhaut beteiligt, was potenziell vor entzündlichen Schäden schützt, sowie am Cholestanol-Stoffwechsel im Kleinhirn, was der Sterol-Clearance über die Blut-Hirn-Schranke hilft.
  Verwandte Referenzen: PMID:21411718, PMID:28190002
• Darüber hinaus kann CYP27A1 zur Aktivierung von Vitamin D beitragen, indem es die 25-Hydroxylierung von Vitamin D3 katalysiert.
  Verwandte Referenzen: PMID:15465040
• Das Protein befindet sich in der inneren Mitochondrienmembran und wird in der neuralen Netzhaut, dem retinalen Pigmentepithel sowie der grauen und weißen Substanz des Kleinhirns nachgewiesen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (aa 431-530); bestätigen Sie die Antikörperreaktivität gegen natives und denaturiertes CYP27A1 durch parallele WB- und ELISA-Assays.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei ~60 kDa erwartet; die Verwendung von mitochondrial angereicherten Lysaten aus Leber- oder Netzhautgewebe kann die Empfindlichkeit der Detektion verbessern.
• Im ELISA sollten Sie die Verwendung eines synthetischen Peptids oder vollständigen rekombinanten CYP27A1 als Fangantigen in Betracht ziehen, um die Bindungsspezifität und -affinität zu bewerten.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-CYP27A1 macht diesen Antikörper für translationswissenschaftliche Studien geeignet, aber validieren Sie die Reaktivität in den relevanten speziesabhängigen Probenmatrizes.
• Da CYP27A1 ein Membranprotein mit geringer Häufigkeit ist, sollten Sie Immunpräzipitations- oder Signalverstärkungsstrategien für Proben mit geringer Expression in Betracht ziehen.

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