Anti-CYP27A1-Polyklonalantikörper für WB, ELISA - Q02318

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CYP27A1-Funktion und Lokalisierung

• Cytochrom P450 27A1 (CYP27A1), auch bekannt als Sterol-26-Hydroxylase oder Vitamin-D3-25-Hydroxylase, ist eine mitochondriale Monooxygenase, die für den Cholesterinstoffwechsel und die Gallensäurensynthese essentiell ist.
• Katalysiert die regio- und stereospezifische Hydroxylierung von Cholesterin und seinen Derivaten, wobei die terminale Methylgruppe in einer dreistufigen Reaktion zu einem Carboxylat umgewandelt wird; dieser Schritt ist sowohl im klassischen als auch im alternativen Gallensäureweg entscheidend. Verwandte Referenzen:
  • PMID:11412116
  • PMID:1708392
  • PMID:2019602
• Erzeugt aktive Oxysterol-Liganden wie 27-Hydroxycholesterin, die an die Kernrezeptoren NR1H2 und NR1H3 wirken, um die Transkription von Genen des Lipidstoffwechsels zu regulieren. Verwandte Referenzen:
  • PMID:12077124
  • PMID:9660774
• Hydroxyliert 7-Ketocholesterin zu 7-Keto,27-Hydroxycholesterin, das den Smoothened (SMO)-Signalweg aktivieren kann (By similarity).
• Vermittelt die Hydroxylierung von Cholestanol im Kleinhirn, was die Steroldiffusion durch die Blut-Hirn-Schranke und die systemische Clearance erleichtert. Verwandte Referenzen:
  • PMID:28190002
• Trägt zur Aktivierung von Vitamin D3 über 25-Hydroxylierung bei, einem Redox-Schritt, der für die volle hormonelle Aktivität erforderlich ist. Verwandte Referenzen:
  • PMID:15465040
• In der inneren Mitochondrienmembran lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Sterolverarbeitung übereinstimmt.
• Auf Proteinebene exprimiert in der neuralen Retina, dem retinalen Pigmentepithel und der grauen/weißen Substanz des Kleinhirns. Verwandte Referenzen:
  • PMID:21411718
  • PMID:28190002
• Mutationen in CYP27A1 verursachen die Cerebrotendinöse Xanthomatose (CTX), eine seltene Lipidspeicherkrankheit, die die Gallensäurensynthese beeinträchtigt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 200–400) deckt einen Teil der katalytischen Domäne ab; stellen Sie sicher, dass die Antikörper-Epitope unter Ihren experimentellen Bedingungen zugänglich ist.
• Für den Western Blot ist eine Bande von etwa 60 kDa zu erwarten; ziehen Sie die Verwendung von mitochondrienangereicherten Lysaten oder Ganzzellextrakten aus Leber oder Retina als positive Kontrollen in Betracht.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität durch Vergleich des Signals in CYP27A1‑überexprimierenden Zellen mit Knockdown/Knockout-Modellen.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper unter Verwendung von rekombinantem CYP27A1 oder Peptidantigen, um die optimale Arbeitsverdünnung zu bestimmen.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht translationale Studien; überprüfen Sie jedoch die Kreuzreaktivität in Ihrer spezifischen Gewebe- oder Zelllinie.

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