Anti-CYBA-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P13498

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CYBA (p22phox)

• CYBA kodiert das p22phox-Protein, die leichte Kette des Cytochrom-b-245-Komplexes (auch als Cytochrom b(558) bekannt), der eine essenzielle Untereinheit des NADPH-Oxidase-Komplexes von Phagozyten darstellt. Verwandte Referenzen: PMID:15824103, PMID:17140397, PMID:38355798

• Der NADPH-Oxidase-Komplex überträgt Elektronen von zytosolischem NADPH auf molekularen Sauerstoff und erzeugt dabei das Superoxid-Anion (O2(-)), eine reaktive Sauerstoffspezies, die für die Wirtsabwehr und die Zellkommunikation von entscheidender Bedeutung ist. Verwandte Referenzen: PMID:38355798

• p22phox dient als Gerüst für den Zusammenbau zytosolischer regulatorischer Untereinheiten. Seine C-terminale Region wird phosphoryliert, wodurch die Bindung von NCF1/p47-phox ermöglicht und die Aktivierung des Komplexes eingeleitet wird. Verwandte Referenzen: PMID:19948736

• CYBA bindet sich außerdem an NOX3 und bildet eine konstitutiv aktive NADPH-Oxidase, die in nicht-phagozytischen Zellen Superoxid erzeugt. Verwandte Referenzen: PMID:15824103, PMID:17140397

• Das Protein lokalisiert sich nach der Aktivierung an der Zellmembran und der phagosomalen Membran.

• CYBA enthält Transmembranhelices und bindet Häm- und Eisenkofaktoren, die für den Elektronentransfer essenziell sind.

• Mutationen in CYBA stehen mit der chronisch-granulomatösen Erkrankung (CGD) in Zusammenhang, einer primären Immundefizienz, die durch eine beeinträchtigte Superoxidproduktion gekennzeichnet ist.

• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 126–195 des humanen CYBA, einer Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist und mit der beobachteten Kreuzreaktivität übereinstimmt. Für den Nachweis von endogenem CYBA sollte eine Validierung des Antikörpers in relevanten Zelllinien (z. B. Neutrophilen, Makrophagen) oder Geweben in Betracht gezogen werden.
• Beim Western Blot wird ein vorhergesagtes Molekulargewicht von 21 kDa erwartet. Posttranslationale Modifikationen können jedoch zu geringfügigen Verschiebungen führen. Geeignete Positiv- und Negativkontrollen sollten eingeschlossen werden.
• Bei Immunfluoreszenzanwendungen lokalisiert sich CYBA an der Plasmamembran, sodass Membranfärbungsmuster beobachtet werden sollten. Die Permeabilisierungsbedingungen müssen für den jeweiligen Zielzelltyp optimiert werden.
• ELISA-Protokolle sollten mit einem geeigneten Beschichtungspuffer und Detektionssystem optimiert werden. Dabei ist auf eine angemessene Blockierung zu achten, um unspezifische Bindungen zu reduzieren.

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