Anti-CYB5R3 Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P00387

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CYB5R3-Funktion und Lokalisierung

• NADH-Cytochrom b5 Reduktase 3 (CYB5R3), auch bekannt als Diaphorase-1, ist ein Flavoprotein-Enzym (FAD-haltig), das beim Menschen durch das CYB5R3 (DIA1)-Gen kodiert wird.
• CYB5R3 katalysiert die Reduktion von zwei Molekülen Cytochrom b5 unter Verwendung von NADH als Elektronendonor und spielt eine entscheidende Rolle im Elektronentransport und in Redoxreaktionen.
• Das Enzym ist durch seine Interaktion mit Cytochrom b5 am Lipidstoffwechsel beteiligt, einschließlich der Cholesterinbiosynthese und der Fettsäureentsättigung.
• CYB5R3 ist an der Membran des Endoplasmatischen Retikulums, der äußeren Mitochondrienmembran und im Zytoplasma lokalisiert, was seine multifunktionalen Rollen widerspiegelt.
• Es wird in späten Stadien der Erythrozytenreifung exprimiert, was auf eine wichtige Funktion im Stoffwechsel der roten Blutkörperchen hindeutet.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Myristoylierung und Phosphorylierung, die seine Membranassoziation und Aktivität regulieren können.
• Mutationen in CYB5R3 sind mit kongenitaler Methämoglobinämie assoziiert, was seine klinische Bedeutung unterstreicht.
• Das Protein hat ein berechnetes Molekulargewicht von etwa 34 kDa (34235 Da), was mit der beobachteten Bande im Western Blot übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 125–334 von humanem CYB5R3 (NP_001165131.1), eine Region, die über typische Isoformen hinweg konserviert ist; überprüfen Sie bei Bedarf die Kreuzreaktivität in Systemen außerhalb von Mensch, Maus oder Ratte.
• Im Western Blot ist eine Hauptbande bei etwa 34 kDa zu erwarten; alternatives Spleißen oder PTMs können zusätzliche Banden erzeugen, daher validieren Sie in dem relevanten Zell- oder Gewebelysat.
• Für die Immunfluoreszenz/ICC kann der Antikörper CYB5R3 im ER und in Mitochondrien nachweisen und erzeugt ein retikuläres und punktförmiges zytoplasmatisches Muster; schließen Sie Organellenmarker für Kolokalisationsstudien ein.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper und verwenden geeignete positive Kontrollen; für Sandwich-Assays wird die Paarung mit einem passenden Detektionsantikörper empfohlen.
• Lagern Sie den Antikörper nach Erhalt bei der empfohlenen Temperatur (z.B. -20°C) und minimieren Sie Gefrier-Tau-Zyklen, um die Aktivität zu erhalten.

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