Anti-CXCR4 Kaninchen monoklonaler Anter für WB, ELISA - P61073

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CXCR4-Funktion und -Lokalisierung

• CXCR4 (C-X-C-Chemokin-Rezeptor Typ 4, CD184, Fusin) ist ein G-Protein-gekoppelter Rezeptor (GPCR), der spezifisch an das Chemokin CXCL12/SDF-1 bindet. Die Ligandenbindung löst eine Signaltransduktion aus, indem die intrazellulären Kalziumionenspiegel erhöht, die MAPK1/MAPK3-Aktivierung verstärkt und die Adenylatzyklase durch Kopplung an Gi-Proteine gehemmt wird. Verwandte Referenzen: PMID:10074102, PMID:10452968, PMID:10644702, PMID:16725153, PMID:17197449, PMID:18799424, PMID:39093700
• Die CXCR4-Signalisierung aktiviert den AKT-Weg und reguliert die Zellmigration, wobei sie eine kritische Rolle bei der Wundheilung spielt. Verwandte Referenzen: PMID:24912431, PMID:28978524
• Neben CXCL12 fungiert CXCR4 als Rezeptor für extrazelluläres Ubiquitin (Erhöhung des intrazellulären Kalziums und Senkung des cAMP) und für bakterielles Lipopolysaccharid (LPS) und vermittelt die Sekretion von Entzündungszytokinen (TNF) durch Monozyten. Verwandte Referenzen: PMID:20228059, PMID:11276205
• Bei viralen Infektionen fungiert CXCR4 als Korezeptor (zusammen mit CD4) für X4-Isolate des humanen Immundefizienzvirus-1 (HIV-1) und als primärer Rezeptor für einige HIV-2-Isolate, wodurch der virale Eintritt gefördert wird. Verwandte Referenzen: PMID:10074122, PMID:10756055, PMID:8849450
• Die subzelluläre Lokalisierung erfolgt vorwiegend an der Plasmamembran, den Zellverbindungen und durchläuft einen Zyklus durch frühe Endosomen, späte Endosomen und Lysosomen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Sulfatierung, Phosphorylierung, Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken; zudem unterliegt es der Ubiquitinierung. Der Rezeptor ist ein Proteoglykan.
• CXCR4 ist weit verbreitet exprimiert, wobei Isoform 1 überwiegt, in Geweben einschließlich peripherer Blutzellen, Milz, Thymus, Rückenmark, Herz, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere, Bauchspeicheldrüse, Gehirn (Kleinhirn, Großhirnrinde, Medulla, Mikroglia, Astrozyten) und Endothelzellen. Alternatives Spleißen ergibt zusätzliche Varianten.
• Per Analogie trägt CXCR4 zur Hämatopoese, der Bildung des Herzventrikelseptums, der Vaskularisation des Magen-Darm-Trakts und der Entwicklung von Kleinhirn-/Hippocampus-Neuronen bei.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen intrazellulären Region (aa 253-352), was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich ein Epitop innerhalb der zytoplasmatischen Domäne erkennt. Für den Western Blot werden denaturierende und reduzierende Bedingungen empfohlen, um das Epitop freizulegen.
• Im Western Blot liegt das vorhergesagte Molekulargewicht von CXCR4 bei ca. 40 kDa; aufgrund von Glykosylierung und anderen posttranslationalen Modifikationen kann die sichtbare Bande jedoch in bestimmten Zelltypen zu einem höheren Molekulargewicht verschoben sein.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie bei der Entwicklung eines Sandwich-Assays einen Detektionsantikörper verwenden, der ein anderes extrazelluläres Epitop erkennt. Validieren Sie die Assay-Bedingungen immer mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.
• Da CXCR4 in vielen Immun- und Endothelzellen exprimiert wird, eignen sich Jurkat-, THP-1- oder PBMC-Lysate als gute positive Kontrollen; für Gewebe können Milz oder Thymus gut funktionieren.
• Wenn Sie die HIV-Korezeptorfunktion untersuchen, beachten Sie, dass der Antikörper den virale Eintritt nicht blockieren kann, da er ein intrazelluläres Epitop erkennt.

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