Anti-CXCL12/SDF-1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P48061

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CXCL12-Funktion und -Lokalisierung

• CXCL12, auch bekannt als stromalzell-abgeleiteter Faktor 1 (SDF-1), ist ein sekretiertes CXC-Chemokin, das aufgrund von alternatives Spleißen in mehreren Isoformen (Alpha, Beta, Gamma, Delta, Epsilon, Theta) existiert.
• CXCL12 fungiert als Chemotaktikum für T-Lymphozyten und Monozyten, aber nicht für Neutrophile, durch Bindung und Aktivierung des CXCR4-Rezeptors, was zu einer raschen intrazellulären Calcium-Mobilisierung und gerichteten Zellmigration führt. Verwandte Referenzen: PMID:18802065, PMID:39093700, PMID:8752281
• Es bindet auch an den atypischen Chemokin-Rezeptor ACKR3 (CXCR7), der als Scavenger-Rezeptor dient und den Beta-Arestin-Signalweg aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:16107333, PMID:19255243
• CXCL12 kann die Integrine ITGAV:ITGB3, ITGA4:ITGB1 und ITGA5:ITGB1 über eine allosterische Bindungsstelle aktivieren, unabhängig von CXCR4. Verwandte Referenzen: PMID:29301984
• Es reguliert die Monozytenmigration positiv und die Monozytenadhäsion negativ über einen LYN-Kinase-vermittelten Mechanismus, der die Bindung von LFA-1 an ICAM-1 hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:18802065
• Eine trunkierte Form, SDF-1-Alpha(3-67), zeigt eine reduzierte chemotaktische Aktivität; die Bindung an Zelloberflächen-Proteoglykane hemmt ihre Bildung, wodurch die Aktivität des全长-CXCL12 lokal erhalten bleibt. Verwandte Referenzen: PMID:14525775
• Die Isoformen Alpha und Beta sind ubiquitär exprimiert mit den höchsten Spiegeln in Leber, Bauchspeicheldrüse und Milz, während Isoform Gamma hauptsächlich im Herzen exprimiert wird und die Isoformen Delta, Epsilon und Theta die höchste Expression in der Bauchspeicheldrüse zeigen.
• Das reife sekretierte Protein enthält wichtige strukturelle Merkmale, darunter zwei Disulfidbrücken und ein Signalpeptid, mit einem Molekulargewicht von ca. 11 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 40–93 von humanem CXCL12 (NP_000600.1), einem Bereich innerhalb der reifen Chemokin-Domäne; daher wird erwartet, dass der Antikörper das sekretierte Protein erkennt. Für Western Blot bereiten Sie Proben unter reduzierenden Bedingungen vor und verwenden ein Standard-SDS-PAGE-Protokoll. Erwägen Sie einen Startverdünnungsbereich von 1:500–1:2000, gefolgt von einer Optimierung.
• Für IHC-P führen Sie eine wärmeinduzierte Antigen-Retrieval durch und validieren die Färbung mit geeigneten Gewebekontrollen. CXCL12 ist sekretiert, daher können extrazelluläre Färbemuster beobachtet werden.
• Bei IF/ICC erwägen Sie die Verwendung eines Sekretionsinhibitors (z. B. Brefeldin A), um das intrazelluläre Signal zu verstärken; optimieren Sie die Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen. Der Antikörper kann den Golgi-/Sekretionsweg markieren.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-CXCL12, was ihn für Studien in diesen Spezies geeignet macht. Bestätigen Sie jedoch stets die Spezifität im entsprechenden Modellsystem.
• Aufgrund von alternatives Spleißen können im WB mehrere Bänder det detected werden; vergleichen Sie mit den bekannten Molekulargewichten der Isoformen (Alpha ~11 kDa). Verwenden Sie eine Positivkontrolle (z. B. rekombinantes CXCL12 oder Zelllinien mit hoher Expression), um die Reaktivität zu verifizieren.

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