Anti-CXCL10/IP-10-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB und ELISA – P02778

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CXCL10

• CXCL10, auch als IP-10 bekannt, ist ein proinflammatorisches CXC-Chemokin, das während entzündlicher Reaktionen entscheidend für die Chemotaxis, Differenzierung und Aktivierung von Immunzellen ist. Zugehörige Referenzen: PMID:11157474 PMID:22652417 PMID:7540647
• Über die Bindung an CXCR3 fördert es die Rekrutierung aktivierter Th1-Lymphozyten zu Entzündungsherden, was für die antivirale Immunität von entscheidender Bedeutung ist. Zugehörige Referenzen: PMID:12663757 PMID:12750173
• Die Bindung an CXCR3 aktiviert die G-Protein-vermittelte Signalübertragung und führt zu einem erhöhten intrazellulären Kalziumfluss, zur Aktinpolymerisation und zur Aktivierung des Phospholipase-C-Signalwegs. Zugehörige Referenzen: PMID:12750173 PMID:19151743
• Es wird hauptsächlich von Monozyten, Endothelzellen und Fibroblasten sezerniert; die Expression im Thymusepithel und in der Mikroglia wird bei viraler Stimulation stark induziert. Zugehörige Referenzen: PMID:11157474 PMID:12663757
• Im ZNS steuert die CXCL10/CXCR3-Achse die Migration der Mikroglia zu Verletzungsstellen, einen wichtigen Schritt bei der neuronalen Reparatur und Reorganisation.
• Zu den strukturellen Merkmalen gehören ein N-terminales Signalpeptid für die Sekretion, zwei für CXC-Chemokine charakteristische konservierte Disulfidbrücken sowie eine posttranslationale Citrullinierung.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von reifem CXCL10 beträgt etwa 10,9 kDa; dieser Antikörper detektiert unter reduzierenden Bedingungen in der SDS-PAGE eine 11-kDa-Bande, die der glykosylierten oder unmodifizierten Form entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht dem Volllängenprotein des humanen CXCL10 (AS 1–98, NP_001556.2) und umfasst die sezernierte Chemokindomäne. Dieses Design ermöglicht die Erkennung sowohl von rekombinantem als auch von endogenem CXCL10.
• Für Western Blotting sollten reduzierende SDS-PAGE-Bedingungen verwendet und geeignete Lysate als Positivkontrollen aufgetragen werden, beispielsweise von mit IFN-γ stimulierten humanen Fibroblasten oder Monozyten. Es wird eine einzelne Bande bei etwa 11 kDa erwartet; für eine genaue Größenbestimmung sollte die Verwendung eines Markers mit niedrigem Molekulargewicht in Betracht gezogen werden.
• Für ELISA kann dieser monoklonale Antikörper nach einer standardmäßigen Optimierung des Sandwich-ELISA als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden. Überprüfen Sie die Kombination mit einem kompatiblen Anti-CXCL10-Antikörper für das spezifische Assay-Format.
• Aufgrund der Spezifität des Antikörpers für humanes CXCL10 wird keine Kreuzreaktivität mit murinem oder Ratten-CXCL10 erwartet; falls eine Spezies-Kreuzreaktivität erforderlich ist, sollte diese im jeweiligen experimentellen System überprüft werden.
• Geeignete Blockierungs- und Waschschritte sollten eingeschlossen werden, um den Hintergrund zu minimieren, insbesondere bei der Verwendung chemilumineszenter oder kolorimetrischer Detektionssysteme.

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