Anti-Cullin 4A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13619

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Cullin-4A-Funktion und Lokalisierung

• CUL4A dient als Kern-Gerüstprotein innerhalb von Cullin-RING-E3-Ubiquitin-Ligase-Komplexen (CRLs) und ermöglicht den Ubiquitin-Transfer auf Substratproteine durch Positionierung sowohl des Substrats als auch des Ubiquitin-konjugierenden Enzyms. Die Ligase-Aktivität ist von der Cullin-Neddylierung abhängig und wird durch die Assozierung von deneddylisiertem CUL4A mit CAND1 gehemmt. Verwandte Referenzen: PMID:14578910, PMID:14739464, PMID:15448697
• Der DCX(DDB2)-Komplex nutzt DDB2 als Substratrezeptor, um XPC, Histone H3-H4 und andere Ziele zu ubiquitinieren, und spielt eine entscheidende Rolle bei der Nukleotid-Exzisionsreparatur und der replikationsgekoppelten Nukleosomenassemblierung. Verwandte Referenzen: PMID:15811626, PMID:16678110, PMID:17041588, PMID:24209620
• Über den DCX(DTL)-Komplex vermittelt CUL4A die PCNA-abhängige Polyubiquitinierung von CDT1 und die MDM2-abhängige Ubiquitinierung von p53/TP53 als Reaktion auf DNA-Schäden und während der DNA-Replikation und leitet auch die Autoubiquitinierung von DTL. Zusätzlich reguliert der DDB1-CUL4A-DTL-Komplex den zirkadianen Rhythmus durch Ubiquitinierung von CRY1 für den Abbau. Verwandte Referenzen: PMID:14578910, PMID:15448697, PMID:15548678, PMID:23478445, PMID:26431207
• Der DCX(ERCC8)-Komplex (CSA-Komplex) ist an der transkriptionsgekoppelten Reparatur (TCR) beteiligt und entfernt DNA-Läsionen aus aktiv transkribierten Genen. Verwandte Referenzen: PMID:12732143, PMID:32355176, PMID:38316879
• Der DCX(AMBRA1)-Komplex fungiert als Hauptregulator des G1/S-Zellzyklusübergangs, indem er phosphoryliertes Cyclin D (CCND1, CCND2, CCND3) für Ubiquitinierung und Abbau markiert. Er reguliert auch CRL5-Komplexe durch Ubiquitinierung und Abbau von Elongin-C (ELOC). Verwandte Referenzen: PMID:33854232, PMID:33854239, PMID:30166453
• CUL4A ist an der Ubiquitinierung zahlreicher weiterer Substrate beteiligt, darunter JUN (über DET1-COP1), CDKN1B/p27 (mit DDB1-SKP2) und HOXA9, was seine breiten regulatorischen Rollen unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:14739464, PMID:16537899, PMID:14609952
• Zusammen mit CUL4B trägt CUL4A zur Ribosomenbiogenese bei. Verwandte Referenzen: PMID:26711351

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1–300 von humanem CUL4A umfasst, was darauf hindeutet, dass der Antikörper die N-terminale Region erkennt; dies kann die Epitopzugänglichkeit in bestimmten Assays beeinflussen.
• Beim Western Blot (WB) ist eine Bande bei etwa 88 kDa zu erwarten; verwenden Sie Proteaseinhibitoren während der Lyse und ziehen Sie frische Proben in Betracht, um Abbau zu vermeiden.
• Für die Immunpräzipitation (IP) validieren Sie die Fähigkeit des Antikörpers, native CUL4A-Komplexe unter nicht-denaturierenden Bedingungen zu erfassen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) optimieren Sie die Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle, da CUL4A überwiegend nukleär lokalisiert ist; bestätigen Sie die Färbespezifität mit geeigneten Kontrollen.
• Dieser Antikörper kreuzreagiert mit humanem, murinem und ratten CUL4A; bei Verwendung von Nagetierproben stellen Sie sicher, dass das Detektionssystem kompatibel ist und dass die Zielbande von endogenen Immunglobulinen in der IP unterscheidbar ist.
• Als polyklonaler Antikörper kann es von Charge zu Charge zu Variabilität kommen; ziehen Sie eine Titration des Antikörpers für jede neue Anwendung in Betracht und schließen Sie positive und negative Kontrollen ein.

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