Anti-Cullin-4A Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q13619

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Cullin-4A-Funktion und Lokalisierung

• CUL4A ist das Gerüstprotein von Cullin-RING-E3-Ubiquitin-Ligasen und erleichtert den Ubiquitintransfer durch Positionierung von Substrat und E2-Enzym (PubMed:14578910, PubMed:14739464, PubMed:15448697). Verwandte Referenzen: PMID:14578910 PMID:14739464 PMID:15448697

• Die E3-Ligase-Aktivität hängt von der CUL4A-Neddylierung ab; deneddylierter CUL4A bindet TIP120A/CAND1, um den Komplex zu hemmen (PubMed:14578910, PubMed:14739464, PubMed:15448697). Verwandte Referenzen: PMID:14578910 PMID:14739464 PMID:15448697

• Die Substratspezifität wird durch DDB1-CUL4A-assoziierte Faktoren (DCAFs) bestimmt: DCX(DET1-COP1) ubiquitiniert JUN (PubMed:14739464); DCX(DDB2) zielt auf XPC (PubMed:15811626) und Histone H3-H4 für den Nukleosomenaufbau ab (PubMed:16678110, PubMed:17041588, PubMed:24209620). Verwandte Referenzen: PMID:14739464 PMID:15811626 PMID:16678110 PMID:17041588 PMID:24209620

• Der DCX(DTL)-Komplex polyubiquitiniert CDT1 und p53/TP53 während DNA-Schäden und Replikation (PubMed:14578910, PubMed:15448697, PubMed:15548678) und vermittelt DTL-Autoubiquitinierung (PubMed:23478445). Verwandte Referenzen: PMID:14578910 PMID:15448697 PMID:15548678 PMID:23478445

• CUL4A ist durch DCX(ERCC8) essentiell für die transkriptionsgekoppelte Reparatur (TCR) (PubMed:12732143, PubMed:32355176, PubMed:38316879). Verwandte Referenzen: PMID:12732143 PMID:32355176 PMID:38316879

• CUL4A beteiligt sich am DesCEND-Weg, indem es Proteine mit C-terminalen Degrons über TRPC4AP- oder DCAF12-haltige DCX-Komplexe abbaut (PubMed:29779948). Verwandte Referenzen: PMID:29779948

• Der DCX(AMBRA1)-Komplex vermittelt den G1/S-Übergang durch Ubiquitinierung von Cyclin D (PubMed:33854232, PubMed:33854239) und reguliert CRL5-Komplexe durch Abbau von Elongin-C (PubMed:30166453). Verwandte Referenzen: PMID:33854232 PMID:33854239 PMID:30166453

• Zusammen mit CUL4B trägt CUL4A zur Ribosomenbiogenese bei (PubMed:26711351). Verwandte Referenzen: PMID:26711351

• CUL4A ist ein Phosphoprotein, das an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt ist, und ein Schlüsselspieler im Ubiquitin-Proteasom-System, das DNA-Reparatur, Zellzyklus und zirkadiane Rhythmen beeinflusst.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 660–759 umfasst; daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein lineares Epitop in der C-terminalen Region von humanem CUL4A. Dieses Design unterstützt oft eine zuverlässige Detektion unter denaturierenden Western-Blot(WB)-Bedingungen.
• Für WB sollte ein erwartetes Band bei etwa 88 kDa beobachtet werden; erwägen Sie die Verwendung eines Protein-Leiters mit geeigneten Molekulargewichtsmarkern und optimieren Sie die Blockierungs- und Antikörperinkubationsbedingungen für den spezifischen Probenlysat.
• Für IHC-P können Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. hitzeinduzierte Epitopfreilegung) vorteilhaft sein; validieren Sie die Färbespezifität in den relevanten humanen Gewebeproben unter Verwendung geeigneter Kontrollen.
• ELISA-Anwendungen können von der Optimierung der Beschichtungsantigenkonzentrationen und Detektionssysteme profitieren, um Linearität und Sensitivität sicherzustellen; die monoklonale Natur dieses Antikörpers hilft, Chargen-zu-Charge-Schwankungen zu reduzieren.
• Da der Antikörper im Kaninchen erzeugt wurde, verwenden Sie Anti-Kaninchen-IgG-Sekundärantikörper zur Detektion; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde über den Menschen hinaus nicht validiert, überprüfen Sie daher die Reaktivität bei Verwendung nicht-humaner Proben.

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