Anti-CTCF Polyklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P49711

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CTCF-Funktion und -Lokalisierung

• CTCF ist ein hochkonserviertes Zinkfinger-DNA-bindendes Protein, das als wichtiger architektonischer Regulator der Chromatin-Organisation und Genexpression fungiert (PubMed:16949368, PubMed:18347100, PubMed:18654629). Verwandte Referenzen: PMID:16949368 PMID:18347100 PMID:18654629
• Es vermittelt die Bildung von Chromatinschleifen, verankert DNA an der Kernlamina und definiert Grenzen zwischen aktiven und heterochromatischen Domänen durch Bindung an Chromatin-Isolatoren (PubMed:18347100, PubMed:18654629, PubMed:19322193). Verwandte Referenzen: PMID:18347100 PMID:18654629 PMID:19322193
• CTCF nimmt an der allelspezifischen Genexpression am geprägten IGF2/H19-Genlocus teil und reguliert die asynchrone Replikation dieses Locus (PubMed:16107875, PubMed:16815976, PubMed:17827499). Verwandte Referenzen: PMID:16107875 PMID:16815976 PMID:17827499
• Es interagiert bevorzugt mit unmethylierter DNA und verhindert die Ausbreitung von CpG-Methylierung; seine Bindung wird durch CpG-Methylierung gehemmt, wodurch DNA-Methylierung mit der Chromatinstruktur verknüpft wird (PubMed:18413740). Verwandte Referenzen: PMID:18413740
• Fungiert als Transkriptionsrepressor an den MYC- und BAG1-Promotoren und als Aktivator von APP; reguliert auch den APOA1/C3/A4/A5-Gencluster und MHC-Klasse-II-Gene (PubMed:8649389, PubMed:9591631, PubMed:9407128, PubMed:18347100, PubMed:19322193). Verwandte Referenzen: PMID:8649389 PMID:9591631 PMID:9407128 PMID:18347100 PMID:19322193
• CTCF kann dimerisieren, was zu lokalen Änderungen der Histonmodifikationen führt (Verlust von Acetylierung, Gewinn von Methylierung) und ist für die Positionierung von Nukleosomen, die Schwesterchromatid-Kohäsion und die Lokalisierung von Kohesin erforderlich (PubMed:12191639, PubMed:18550811). Verwandte Referenzen: PMID:12191639 PMID:18550811
• Lokalisiert im Kern, Nukleoplasma, Chromosomen und Zentromeren; spielt eine Rolle bei der Rekrutierung von CENPE zu perizentromerischen/zentromerischen Regionen während der Mitose (PubMed:26321640). Verwandte Referenzen: PMID:26321640
• Weit verbreitet exprimiert in menschlichen Geweben, fehlt in primären Spermatozyten; wirkt als Tumorsuppressor und ist mit Entwicklungsstörungen verbunden (PubMed:12191639). Verwandte Referenzen: PMID:12191639

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen der N-terminalen Region (aa 1-260) entspricht, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, kann dieser Antikörper mit diesen Spezies kreuzreagieren; überprüfen Sie dies bei Ihren spezifischen Probentypen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) und die Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie Protokolle zur Kernpermeabilisierung und Antigen-Retrieval in Betracht ziehen, um das Signal zu verstärken.
• Bei der Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) zielt der Antikörper auf reichlich vorhandene CTCF-Bindungsstellen ab; optimieren Sie die Vernetzungs- und Scherbedingungen, um robuste Protein-DNA-Komplexe einzufangen.
• Die erwartete Bandengröße beim Western Blot liegt bei ca. 83 kDa; validieren Sie mit geeigneten Kontrollen, da posttranslationale Modifikationen die Wanderung verschieben können.
• ELISA kann für hochdurchsatzfähige Bindungsassays eingesetzt werden; bestätigen Sie optimale Beschichtungspuffer und Detektionssysteme.

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