Anti-CRYZ-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q08257

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CRYZ-Funktion und -Lokalisierung

• CRYZ (Zeta-Crystallin) ist ein multifunktionelles Protein, das sowohl mRNA-stabilisierende als auch enzymatische Oxidoreduktase-Aktivitäten besitzt. Es bindet an AU-reiche Elemente (ARE) in der 3'-UTR von Ziel-mRNAs, um deren Stabilität zu erhöhen, einschließlich mRNAs, die für SLC12A1, an der Glutamin-Katabolismus beteiligte Enzyme und das anti-apoptotische Protein BCL2 kodieren. Es katalysiert auch die Reduktion von Orthochinonen in Gegenwart von NADPH, was auf eine Rolle bei der Detoxifikation von Xenobiotika und dem Schutz vor oxidativem Stress hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:17497241 PMID:20103721
• Während einer metabolischen Azidose trägt CRYZ zu adaptiven Erhöhungen der renalen Ammoniogenese und der transepithelialen NH4+-Resorption bei, indem es die mRNAs von Glutamin-Katabolismus-Enzymen und dem SLC12A1-Kotransporter in der aufsteigenden Dickarm-Schleife der Niere stabilisiert.
• CRYZ ist hauptsächlich im Zytoplasma/Cytosol lokalisiert, was seinen Rollen bei der mRNA-Stabilisierung und enzymatischen Reaktionen entspricht.
• Gewebsspezifität: CRYZ wird in der Linse auf sehr niedrigem Niveau exprimiert, im Gegensatz zu seiner höheren Expression in anderen Geweben, wo es an der mRNA-Regulation und dem Redox-Gleichgewicht beteiligt ist.
• Das CRYZ-Gen unterliegt alternatives Spleißen, und das Protein ist posttranslationalen Modifikationen unterworfen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung (wie in den UniProt-Schlüsselwörtern angegeben), was seine Aktivität oder Interaktionen regulieren könnte.
• Proteinmolekulargewicht: Die kanonische Isoform hat ein berechnetes Molekulargewicht von ca. 35,2 kDa (UniProt: 35207 Da), obwohl der Lieferant 35kDa angibt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen war ein rekombinantes Fusionsprotein, das den Aminosäuren 1-329 von humanem CRYZ (NP_001123514.1) entspricht und das Full-Length-Protein umfasst. Dieses Design kann die Erkennung mehrerer Isoformen ermöglichen, jedoch sollte eine Validierung für spezifische Spleißvarianten durchgeführt werden.
• Dieser Antikörper wird für Anwendungen im Western Blot (WB) und ELISA empfohlen. Für WB sollte ein Verdünnungsbereich in Betracht gezogen werden, der für polyklonale Antikörper typisch ist (z. B. 1:500-1:2000), und eine Validierung in Ihrem Probenssystem durchgeführt werden. Das vorhergesagte Molekulargewicht liegt bei ~35kDa; eine Bande in dieser Größe wird in Lysaten von Human, Maus und Ratte erwartet, obwohl posttranslationale Modifikationen oder alternatives Spleißen die Wanderung verschieben könnten.
• Da CRYZ an der mRNA-Stabilität und Redox-Regulation beteiligt ist, kann seine Expression durch azidotischen Stress, oxidative Bedingungen oder andere Reize moduliert werden. Erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver Kontrollen (z. B. Nierenzelllinien unter Azidose) und das Einbeziehen von Ladungskontrollen für quantitative WBs.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Human, Maus und Ratte berichtet, aber speziesbedingte Variationen in der Sequenz können die Affinität beeinflussen. Überprüfen Sie die Leistung in Ihrem Modellorganismus mit einem vorläufigen Titrationsversuch.

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