Anti-CRYAA Kaninchen-Polyclonal-Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P02489

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Alpha-Crystallin A-Kette

• Die Alpha-Crystallin A-Kette, auch bekannt als Hitzeschockprotein beta-4 (HspB4), ist ein wichtiges Strukturprotein der Wirbeltieraugenlinse und trägt zu ihrer Transparenz und ihrem Brechungsindex bei.
  Verwandte Referenzen: PMID:18302245
• In seiner oxidierten Form wirkt er als molekulares Chaperon und verhindert die Aggregation denaturierter Proteine unter verschiedenen Stressbedingungen – eine Funktion, die für die Erhaltung der Linsentransparenz entscheidend ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:18199971, PMID:19595763, PMID:22120592
• CRYAA ist für die korrekte Bildung von Linsenintermediärfilamenten als Teil eines Komplexes mit BFSP1 und BFSP2 erforderlich.
  Verwandte Referenzen: PMID:28935373
• Es ist ein Mitglied der Familie der kleinen Hitzeschockproteine (sHSP) und wird auf Proteinebene überwiegend in der Augenlinse exprimiert.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst sowohl das Zytoplasma als auch den Zellkern.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung, Oxidation und Disulfidbindungsbildung, die seine Chaperonaktivität regulieren können.
• Mutationen in CRYAA sind mit autosomal-dominanter Katarakt assoziiert, was seine Bedeutung für die Linsenphysiologie unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem volllängen menschlichen CRYAA-Protein (Aminosäuren 1-173), was eine breite Erkennung sowohl nativer als auch denaturierter Formen ermöglicht. Bei der Western Blot sollte eine spezifische Bande um 20 kDa in positiven Proben nachweisbar sein; zur Überprüfung empfehlen wir die Verwendung eines rekombinanten Proteinkontrolls.
• Kreuzreaktivität wurde für Mensch, Maus, Ratte und Zebrafisch bestätigt, daher ist der Antikörper für artenübergreifende Studien geeignet. Dennoch wird eine Validierung in Ihrem spezifischen Modellsystem empfohlen.
• Für Immunfluoreszenz (IF-P) ist wahrscheinlich eine Permeabilisierung von Zellen oder Gewebeschnitten erforderlich, um zytoplasmatisches und nukleäres CRYAA nachzuweisen. Eine Optimierung von Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen wird empfohlen.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zur Antigenfang oder zum Nachweis verwendet werden. Die Paarung mit einem passenden Sekundärantikörper oder Nachweissystem sollte empirisch optimiert werden.
• Da CRYAA unter unterschiedlichen Bedingungen sowohl in reduzierter als auch oxidierter Form vorliegen kann, sollten Sie die Probenaufbereitungsbedingungen (z. B. reduzierend vs. nicht-reduzierend) berücksichtigen, um spezifische Redoxzustände zu untersuchen.

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