Anti-CROT Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q9UKG9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CROT-Funktion und Lokalisierung

• CROT, auch bekannt als COT, ist eine peroxisomale Carnitin O-Octanoyltransferase, die die Übertragung von Acylgruppen von Coenzym A auf Carnitin katalysiert und so den Transport von Fettsäuren über Peroxisomenmembranen erleichtert.
• Es spielt eine Schlüsselrolle in der Beta-Oxidation von Fettsäuren, mit der höchsten enzymatischen Aktivität gegenüber mittelkettigen Substraten (C6 bis C10).
• CROT wandelt 4,8-Dimethylnonanoyl-CoA, das Endprodukt der Pristansäure-Beta-Oxidation, in seinen Carnitin-Ester um, wodurch ein weiterer Metabolismus oder Export ermöglicht wird.
• Das Enzym ist ausschließlich in Peroxisomen lokalisiert, den Organellen, die für den Fettsäureabbau und die Entgiftung von Wasserstoffperoxid verantwortlich sind.
• CROT gehört zur Familie der Carnitin-Acyltransferasen, zu der auch Enzyme wie CPT1 und CPT2 gehören, und ist für die Lipidhomöostase essentiell.
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung wurden identifiziert, obwohl ihre funktionelle Auswirkung noch vollständig charakterisiert werden muss.
• Es beteiligt sich an intrazellulären Transportprozessen, indem es peroxisomale Metaboliten transportiert und so den Lipidstoffwechsel mit der gesamten zellulären Energieregulation verbindet.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, die gewebespezifische Rollen haben können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-87) des humanen CROT, was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein Epitop in dieser Domäne erkennen könnte. Die Spezifität sollte mit rekombinantem Protein oder Knockout-Kontrollen überprüft werden.
• Für Western Blot (WB) ist basierend auf dem berechneten Molekulargewicht eine Bande um 70 kDa zu erwarten; posttranslationale Modifikationen oder Isoform-Variationen können jedoch zu leichten Verschiebungen führen. Verwenden Sie geeignete reduzierende/denaturierende Bedingungen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-CROT, bei der Arbeit mit anderen Spezies wird jedoch eine Sequenzalignierung empfohlen.
• Für die Immunpräzipitation (IP) sollten die Antikörperkonzentration und die Inkubationsbedingungen optimiert werden, um unspezifische Bindung zu vermeiden.
• Die ELISA-Leistung wurde vermerkt; erwägen Sie die Verwendung von Standard-Sandwich-ELISA-Protokollen mit geeigneter Blockierung, um den Hintergrund zu minimieren.

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