Anti-CRB1 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P82279

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Crumbs-Homolog-1-Proteins

• Das Crumbs-Homolog-1-Protein (CRB1) ist ein Mitglied der Crumbs-Proteinfamilie, die durch extrazelluläre EGF-ähnliche Domänen und intrazelluläre Motive gekennzeichnet ist, und spielt eine zentrale Rolle bei Zellpolarität und Zelladhäsion.
• CRB1 ist für die Morphogenese der Photorezeptoren in der Netzhaut unerlässlich, wo es zur Aufrechterhaltung der apikobasalen Polarität und der interzellulären Verbindungen zwischen Photorezeptoren und Müller-Gliazellen beiträgt (durch Ähnlichkeit).
• Das Protein ist an der apikalen Zellmembran sowie in den äußeren und inneren Segmenten der Photorezeptoren lokalisiert und wird auch in sezernierten Formen nachgewiesen, was mit seiner Funktion in der extrazellulären Matrix und bei Zell-Zell-Kontakten übereinstimmt.
• CRB1 wird bevorzugt in der Netzhaut exprimiert, zusätzlich jedoch auch im Gehirn, in den Hoden, im fetalen Gehirn und im fetalen Auge. In der Netzhaut konzentriert es sich an der äußeren Grenzmembran und apikal zu den Adhärenzkontakten. Verwandte Referenzen: PMID:15914641
• Strukturell enthält CRB1 mehrere EGF-ähnliche Wiederholungen mit potenzieller Kalziumbindung und Disulfidbrückenbildung, ein Signalpeptid, eine Transmembrandomäne und einen kurzen zytoplasmatischen Schwanz. Außerdem unterliegt es alternativem Spleißen, wodurch Isoformen entstehen (CRB1-A, CRB1-B, CRB1-C).
• Mutationen im CRB1-Gen stehen mit schweren Netzhautdystrophien in Verbindung, darunter die kongenitale Leber-Amaurose 8 (LCA8) und die Retinitis pigmentosa 12 (RP12), was seine entscheidende Funktion für die Gesundheit der Netzhaut unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 28–133 in der extrazellulären N-terminalen Region, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich das vollständige CRB1 und möglicherweise auch dessen Isoformen nachweist. Erwägen Sie die Validierung der Spezifität mit isoformspezifischen Kontrollen.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 154 kDa. Aufgrund von Glykosylierung und alternativem Spleißen können zusätzliche Banden auftreten. Optimieren Sie den Gelanteil und die Transferbedingungen für große Proteine.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sind Netzhautgewebeschnitte von Menschen oder Mäusen ideale Positivkontrollen. Für ein optimales Signal können eine Antigenretrieval und eine Titration erforderlich sein.
• Dieser polyklonale Antikörper kann in ELISA-Tests verwendet werden. Stellen Sie geeignete Negativkontrollen sicher, um die Bindung an das Zielprotein zu bestätigen.

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