Kaninchen-polyklonaler Anti-CRACR2A-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q9BSW2

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CRACR2A

• CRACR2A, auch bekannt als EF-Hand-kalziumbindendes Domänen enthaltendes Protein 4B (EFCAB4B) oder Ras-verwandtes Protein Rab-46 (RAB46), ist ein kalziumbindendes Protein mit GTPase-Aktivität, das eine doppelte Rolle beim speicheroperierten Kalziumeinstrom (SOCE) und beim intrazellulären Transport spielt. Zugehörige Referenzen: PMID:27016526
• In T-Zellen fungiert CRACR2A als zytoplasmatischer Kalziumsensor, der die Clusterbildung von ORAI1 und STIM1 an den Kontaktstellen zwischen ER und Plasmamembran erleichtert und dadurch die Aktivierung des CRAC-Kanals fördert. Nach dem Kalziumeinstrom dissoziiert es vom Komplex, um die Kanalstabilität zu regulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:27016526
• Als Rab-GTPase vermittelt CRACR2A in Endothelzellen als Reaktion auf eine Histaminstimulation den retrograden Transport von Weibel-Palade-Körperchen (WPBs) zum Mikrotubuli-organisierenden Zentrum (MTOC) und wirkt dabei kalziumunabhängig. Zugehörige Referenzen: PMID:31092558
• CRACR2A fungiert außerdem als kalziumreguliertes Adapterprotein für Dynein, aktiviert den Dynein-vermittelten Transport und reguliert den endosomalen Transport von CD47. Zugehörige Referenzen: PMID:30814157
• Es verbindet TCR-Signalwege, indem es sich bei der T-Zell-Aktivierung an der immunologischen Synapse lokalisiert, wo es mit VAV1 interagiert, um nachgeschaltete Ca2+-NFAT- und JNK-Signalkaskaden zu aktivieren. Zugehörige Referenzen: PMID:27016526
• Auf subzellulärer Ebene ist CRACR2A im Zytoplasma, an der Plasmamembran, im Golgi-Apparat, im Trans-Golgi-Netzwerk sowie in Verbindung mit Vesikeln und dem Mikrotubuli-organisierenden Zentrum zu finden. Seine Lokalisation verändert sich abhängig vom Aktivierungszustand und Zelltyp.
• Die Gewebeexpression umfasst T-Zell-Linien wie Jurkat und Endothelzellen, mit einer spezifischen Lokalisation in Weibel-Palade-Körperchen der Endothelzellen. Zugehörige Referenzen: PMID:25475730, PMID:31092558, PMID:27016526, PMID:30814157
• Das Protein enthält EF-Hand-Domänen zur Kalziumbindung und eine GTPase-Domäne und wird prenlyiert (wie durch die Schlüsselwörter angegeben), was auf eine Membranassoziation hindeutet. Aufgrund alternativen Spleißens existieren mehrere Isoformen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–200) des humanen CRACR2A und kann daher konservierte Epitope über verschiedene Isoformen hinweg erkennen. Erwägen Sie, den isoformspezifischen Nachweis in Ihrem experimentellen System zu überprüfen.
• Für den Western-Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 83 kDa. Achten Sie bei der Analyse von endogenem CRACR2A auf mögliche posttranslationale Modifikationen oder Spleißvarianten, die die Migration verändern können.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Bedingungen für die Antigenretrieval an das jeweilige Gewebe und die Antikörperbindung angepasst werden. Validieren Sie die Färbemuster anhand geeigneter Positivkontrollen (z. B. T-Zell-reiche Gewebe) und Negativkontrollen.
• Der Antikörper zeigt gemäß den Angaben des Lieferanten eine Kreuzreaktivität mit Mausproben. Wir empfehlen jedoch, die Spezifität in Mausgeweben oder Maus-Zelllinien vor der Anwendung zu validieren.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie ein sekundäres Nachweissystem verwenden, das mit polyklonalen Kaninchen-Antikörpern kompatibel ist. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.

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