Anti-CPS1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P31327

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CPS1-Funktion und -Lokalisierung

• CPS1 (Carbamoylphosphat-Synthase [Ammoniak], mitochondrial) ist ein Schlüsselenzym des Harnstoffzyklus, das die ATP-abhängige Synthese von Carbamoylphosphat aus Ammoniak und Bicarbonat katalysiert und für die Ammoniakentgiftung in ureotelischen Tieren essentiell ist.
• Das Protein wird hauptsächlich in Leber und Dünndarm exprimiert, was mit seiner zentralen Rolle im Stickstoffmetabolismus übereinstimmt.
• CPS1 lokalisiert überwiegend in der mitochondrialen Matrix, wurde aber auch im Zellkern, Nukleolus und an der Zellmembran nachgewiesen, was auf zusätzliche nicht-kanonische Funktionen hindeutet.
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und Glykosylierung sind beschrieben, die die Enzymaktivität oder Lokalisierung regulieren können.
• CPS1 ist ein allosterisches Enzym und Mitglied der Ligase-Familie, das ATP-Bindungsstellen enthält, die für seine katalytische Funktion entscheidend sind.
• Alternatives Spleißen führt zu mehreren Isoformen, und Mutationen in CPS1 verursachen einen Carbamoylphosphat-Synthetase-I-Mangel, eine schwere Harnstoffzyklusstörung.
• Eine aufgeklärte 3D-Struktur gibt Einblicke in die Domänenarchitektur und Regulationsmechanismen des Enzyms.
• Das reife Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 165 kDa (UniProt: 164.939 Da).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die zentrale Region (aa 750-970) von humanem CPS1 und zielt auf einen potenziell artenübergreifend konservierten Bereich ab; überprüfen Sie die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen Proben-System.
• Für Western Blot (WB) ist ein Band um 165 kDa zu erwarten; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und ziehen Sie Ladekontrollen wie GAPDH oder Beta-Aktin zur Normalisierung in Betracht.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) optimieren Sie die Fixierung (z.B. 4% PFA) und Permeabilisierung (z.B. 0,1% Triton X-100), um die mitochondriale Lokalisierung nachzuweisen; färben Sie bei Bedarf mit mitochondrialen Markern gegen.
• Bei ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper und verwenden Sie ein geeignetes Beschichtungsantigen; das rekombinante Immunogen kann als Positivkontrolle dienen.

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