Anti-CPS1 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P31327

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CPS1-Funktion und Lokalisierung

• CPS1 (Carbamoylphosphat-Synthetase I) ist ein mitochondriales Enzym, das den ersten geschwindigkeitsbestimmenden Schritt des Harnstoffzyklus katalysiert und Ammoniak sowie Bicarbonat in Carbamoylphosphat umwandelt.
• Das Enzym spielt eine entscheidende Rolle bei der Entgiftung von überschüssigem Ammoniak bei ureotelischen Tieren, wobei der Harnstoffzyklus als primärer Weg für die Stickstoffentsorgung dient.
• CPS1 wird überwiegend in der Leber und im Dünndarm exprimiert, was mit seiner zentralen Rolle bei der Ammoniak-Clearance und dem Aminosäurekatabolismus übereinstimmt.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist primär mitochondrial, jedoch wurde CPS1 auch im Zellkern, im Nukleolus und an der Zellmembran nachgewiesen, was auf mögliche Funktionen außerhalb des Harnstoffzyklus hindeutet.
• Es wurden mehrere posttranslationale Modifikationen berichtet, darunter Acetylierung, Phosphorylierung und Glykosylierung, die die Enzymaktivität oder die subzelluläre Verteilung regulieren könnten.
• Alternatives Spleißen erzeugt verschiedene Isoformen, und Mutationen in CPS1 sind mit einem Carbamoylphosphat-Synthetase-I-Mangel assoziiert, einer schweren Störung des Harnstoffzyklus.
• CPS1 gehört zur ATP-Grasp-Fold-Superfamilie und fungiert als Ligase, die ATP und eine allosterische Aktivierung durch N-Acetylglutamat erfordert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Resten 1356–1482 des humanen CPS1, einer Region innerhalb der C-terminalen Domäne; prüfen Sie bei Verwendung nicht-denaturierender Assays, ob dieses Epitop in der nativen Konformation Ihrer Probe zugänglich ist.
• Für Western Blot wird eine Bande bei etwa 165 kDa erwartet; validieren Sie die Spezifität in relevanten Gewebelysaten (z. B. Leber) und verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker.
• Bei IHC-P sollten die Bedingungen für die Antigen-Demaskierung für den mitochondrialen und nukleären Nachweis optimiert werden; validieren Sie die Färbemuster anhand bekannter Gewebekontrollen.
• Für ELISA kann die Paarung mit einem Fänger-Antikörper, der auf ein anderes Epitop abzielt, erforderlich sein; berücksichtigen Sie bei der Versuchsplanung die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-CPS1.

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