Anti-CPS1-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA – P31327

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CPS1

• CPS1, auch als Carbamoylphosphat-Synthetase I bekannt, ist ein mitochondriales Enzym, das den ersten festgelegten Schritt des Harnstoffzyklus katalysiert, indem es Ammoniak in Carbamoylphosphat umwandelt, das für die Ammoniakentgiftung bei ureotelischen Tieren essenziell ist.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Entfernung von überschüssigem Ammoniak aus den Zellen, vor allem in der Leber und im Dünndarm, wo es stark exprimiert wird.
• Das Protein ist in der mitochondrialen Matrix lokalisiert, wurde jedoch auch im Zellkern, im Nukleolus und in der Zellmembran nachgewiesen, was auf zusätzliche nicht-kanonische Funktionen hindeutet.
• CPS1 durchläuft verschiedene posttranslationale Modifikationen, darunter Acetylierung und Phosphorylierung, und weist alternatives Spleißen auf, das möglicherweise seine Aktivität oder Lokalisierung reguliert.
• Als ATP-bindendes, allosterisches Enzym gehört es zur Familie der Ligasen und ist eine Schlüsselkomponente des Harnstoffzyklus; Mutationen wurden mit krankheitsassoziierten Varianten in Verbindung gebracht.
• Das reife Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 165 kDa, entsprechend seinem 164.939 Da schweren Vorläuferprotein nach der Abspaltung des mitochondrialen Transitsequenzpeptids.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Für Western Blotting erfordert der Nachweis des Zielproteins bei etwa 165 kDa eine geeignete Gelkonzentration, beispielsweise 6–8 % SDS-PAGE, sowie verlängerte Transferzeiten aufgrund des hohen Molekulargewichts.
• Bei Immunfluoreszenzprotokollen (IF-P) sollten die optimalen Bedingungen für Fixierung und Permeabilisierung bestimmt werden, um die mitochondriale Struktur zu erhalten und gleichzeitig den Antikörperzugang zu ermöglichen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten der pH-Wert und die Methode der Antigen-Retrieval validiert werden; Gewebeschnitte von Leber und Dünndarm eignen sich aufgrund der Gewebespezifität als geeignete Positivkontrollen.
• Da es sich beim Immunogen um ein synthetisches Peptid aus den Resten 100–200 handelt, kann die Spezifität durch Peptidkompetitionsassays oder eine Western-Blot-Analyse mit CPS1-Knockout-Zelllysaten bestätigt werden, sofern verfügbar.

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