Anti-COX5B monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10606

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von COX5B

• COX5B, auch bekannt als Cytochrom-c-Oxidase-Untereinheit 5B oder COXVB, ist eine kernkodierte Komponente des Komplex IV (Cytochrom-c-Oxidase) in der mitochondrialen Elektronentransportkette.
• Es katalysiert die terminale Reduktion von molekularem Sauerstoff zu Wasser und koppelt den Elektronentransport an den Protonenpump durch die innere Mitochondrienmembran, um die ATP-Synthese anzutreiben.
• Das Protein lokalisiert spezifisch zur inneren mitochondrialen Membran, wo es sich mit anderen Untereinheiten des gesamten Cytochrom-c-Oxidase-Holenzyms verbindet.
• Gemeinsam mit den Komplexen II und III trägt COX5B zur Atmungskette bei, die Elektronen von NADH und Succinat auf Sauerstoff überträgt und einen elektrochemischen Gradienten aufbaut.
• Das aktive Zentrum der Cytochrom-c-Oxidase umfasst Häm A3 und Kupfer B (CuB), wobei COX5B eine strukturelle Rolle bei der Erhaltung der Integrität und Funktion des zweikernigen Zentrums spielt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Acetylierung, und das Protein bindet ein Zinkion (metallbindend), wie durch Proteomik und direkte Proteinsequenzierung nachgewiesen wurde.
• Das reife Protein (nach Spaltung des mitochondrialen Transitpeptids) hat ein Molekulargewicht von etwa 14 kDa, was dem Großteil der reifen Untereinheit entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 29–129 des menschlichen COX5B, eine Region, die dem reifen Protein nach Entfernung der mitochondrialen Targeting-Sequenz entspricht; dieses Design verbessert die Erkennung der endogenen prozessierten Form.
• Für Western Blotting (WB) empfehlen sich reduzierende Bedingungen und mitochondrial angereicherte Proteinextrakte, um die Detektion der ~14 kDa-Bande zu maximieren.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) zeigt die COX5B-Färbung typischerweise ein punktförmiges mitochondriales Muster; validieren Sie die Lokalisation mit Organellenmarkern.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit COX5B von Maus und Ratte; überprüfen Sie die Reaktivität in Zell- oder Gewebslysaten der entsprechenden Art, da die Sequenzhomologie in der Immunogenregion variieren kann.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnungen mit rekombinantem COX5B oder mitochondrialen Fraktionen aus Proben von Mensch, Maus oder Ratte.
• Als monoklonaler Antikörper ist er für eine konsistente Charge-zu-Charge-Leistung geeignet; dennoch sollte jede neue Anwendung im vorgesehenen Probensystem titriert und validiert werden.

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