Anti-COX IV Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P13073

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von COX IV

• Cytochrom-c-Oxidase-Untereinheit 4 Isoform 1 (COX IV-1) ist eine kernkodierte Untereinheit des Komplexes IV (Cytochrom-c-Oxidase), dem terminalen Enzym der mitochondrialen Elektronentransportkette.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der oxidativen Phosphorylierung, indem es zur Assemblierung und Regulation des Holoenzyms beiträgt, das die Reduktion von molekularem Sauerstoff zu Wasser katalysiert.
• Das Enzym koppelt den Elektronentransfer von Cytochrom c zu Sauerstoff mit der Translokation von Protonen über die innere Mitochondrienmembran und erzeugt so den Protonengradienten, der für die ATP-Synthese essenziell ist.
• COX IV-1 wird durch das Gen COX4I1 kodiert und ist ubiquitär in menschlichen Geweben exprimiert, mit einer Molekülmasse von etwa 19,5 kDa für das reife Protein.
• Das Protein ist in der inneren Mitochondrienmembran verankert und wird mit einem spaltbaren Transitpeptid synthetisiert, das den Import in die Mitochondrien steuert.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die die Aktivität und Assemblierung des Komplexes IV modulieren können.
• Mutationen in COX4I1 sind mit der mitochondrialen Komplex-IV-Defizienz, nukleärer Typ 16 (MC4DN16), einer schweren multisystemischen Erkrankung, verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen (N-terminales Peptid innerhalb der Aminosäuren 1–100) deutet auf eine Epitoperkennung in einer Region hin, die über Mensch, Maus und Ratte hinweg konserviert ist, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt. Berücksichtigen Sie dies bei der Entwicklung isoformspezifischer Nachweisassays.
• Für das Western Blotting beträgt die vorausgesagte Molekülmasse von COX IV ~20 kDa; validieren Sie den Nachweis mit geeigneten Positivkontrolllysaten (z. B. Mitochondrienfraktionen aus HeLa, HEK293 oder Nagerleber).
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) sollten Standardmethoden zur Antigenrettung (Citratpuffer, pH 6,0 oder EDTA, pH 9,0) und die Blockierung endogener Peroxidase angewendet werden; gewebespezifische Expressionsmuster können eine Optimierung erfordern.
• Bei der Durchführung von ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Nachweisreagens für natives oder rekombinantes COX IV verwendet werden; Kreuzreaktivität mit dem Komplex-IV-Holokomplex oder Untereinheiten kann die Assaygestaltung beeinflussen – eine empirische Validierung wird empfohlen.
• Verwenden Sie immer speziesangepasste Kontrollen und bestätigen Sie bei der Untersuchung von Krankheitsmodellen das Vorhandensein von Mutationen, die die Epitopzugänglichkeit verändern könnten.

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