Anti-COPBb2 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P35606

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: COPB2-Funktion und -Lokalisierung

• COPB2 kodiert die Coatomer-Untereinheit beta'-COP (beta'-coat protein, p102), eine Kernkomponente des COPI-Coatomer-Komplexes, der am intrazellulären vesikulären Transport beteiligt ist.
• Der Coatomer-Komplex bindet an Dilysin-Motive und assoziiert reversibel mit nicht-clathrinbeschichteten Golgi-Vesikeln und vermittelt so den biosynthetischen Proteintransport vom ER durch den Golgi-Apparat zum trans-Golgi-Netzwerk.
• COPB2 ist für das Knospen (Budding) des Golgi-Apparats und den retrograden Golgi-zu-ER-Transport von Dilysin-markierten Proteinen unerlässlich, erhält die strukturelle Integrität des Golgi-Apparats und reguliert die Verarbeitung, Aktivität und endozytische Wiederverwendung von LDL-Rezeptoren.
• COPB2 fungiert als selektives Bindungsprotein (RACK) für Proteinkinase C Epsilon-Typ und verknüpft den Membrantransport mit der Zellsignalisierung durch GTP-abhängige Bindung an Golgi-Membranen.
• Das Protein lokalisiert sich vorwiegend im Zytoplasma, an der Membran des Golgi-Apparats und an den Membranen von COPI-beschichteten Vesikeln, was seine Rolle bei der Bildung von COPI-Vesikeln und der Sortierung von Fracht unterstreicht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die die Coatomer-Zusammenbau, Stabilität oder Wechselwirkungen mit Fracht und regulatorischen Faktoren modulieren können.
• Mutationen in COPB2 sind mit primärer Mikrozephalie (MCPH19) und Osteoporose verbunden, was seine wesentlichen Rollen bei der Zellteilung und dem Knochenstoffwechsel hervorhebt.
• Das Protein enthält WD-Wiederholungsdomänen, die Protein-Protein-Wechselwirkungen ermöglichen, die für die Integrität und Funktion des Coatomer-Komplexes kritisch sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 657-906) umspannt die C-terminale WD-Wiederholungsregion; berücksichtigen Sie bei der Beurteilung der Kreuzreaktivität zwischen verschiedenen Spezies, dass der Antikörper konservierte strukturelle Motive erkennen könnte.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 102 kDa; verwenden Sie einen geeigneten Gel-Prozentsatz (z. B. 8 % SDS-PAGE) und optimieren Sie die Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC ist ein perinukleäres, golgiähnliches Färbemuster zu erwarten; eine Co-Färbung mit einem cis-Golgi-Marker (z. B. GM130) wird zur Validierung empfohlen.
• Für ELISA verwenden Sie das rekombinante Immunogen als Positivkontrolle und standardisieren die Assay-Bedingungen mit geeigneten Blockier- und Waschpuffern.
• Überprüfen Sie die Antikörperspezifität unter Verwendung von COPB2-Knockout- oder Knockdown-Zelllysaten, sofern verfügbar, da COPB2 essentiell ist und dessen Verlust die Zellviabilität beeinträchtigen kann.
• Um die Antikörperaktivität zu erhalten, aliquotieren Sie und lagern Sie bei -20 °C oder niedriger; vermeiden Sie wiederholte Gefrier- und Auftauzyklen sowie eine längere Exposition gegenüber Raumtemperatur (Versand im Eisbeutel).

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