Anti-Komplement-C3-Kaninchen-PolymAb für WB und ELISA – P01024 / P01027

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Komplement C3

• Komplement C3 ist eine zentrale Komponente des Komplementsystems und zirkuliert als Vorläuferprotein, das bei Aktivierung proteolytisch in funktionelle Fragmente (C3a, C3b) gespalten wird.
• C3b, das durch die Spaltung mittels C3-Konvertase entsteht, bindet sich über eine reaktive Thioesterbindung kovalent an Pathogenoberflächen, wirkt als Opsonin für die Phagozytose und bildet die C5-Konvertase zur Aktivierung von C5. Zugehörige Literatur: PMID:28264884, PMID:31507604, PMID:3653927, PMID:6903192, PMID:12878586, PMID:18204047, PMID:2387864, PMID:624565, PMID:6554279
• Das Anaphylatoxin C3a vermittelt lokale Entzündungen, indem es an C3AR1 bindet, eine Signalübertragung über G-Protein-gekoppelte Rezeptoren auslöst und Mastzellen, Basophile, Makrophagen und Neutrophile zur Freisetzung von Entzündungsmediatoren sowie zur Migration an Entzündungsherde anregt. Zugehörige Literatur: PMID:6968751, PMID:37169960, PMID:37852260, PMID:8702752, PMID:23383423, PMID:342601, PMID:5778786
• Neben seinen immunologischen Funktionen wirkt C3a als adipogenes Hormon (ASP), das über C5AR2 die Triglyceridsynthese und den Glukosetransport in Adipozyten stimuliert und dadurch die Fettspeicherung sowie die postprandiale Lipidclearance ohne proinflammatorische Aktivität reguliert. Zugehörige Literatur: PMID:10432298, PMID:15833747, PMID:16333141, PMID:11773063, PMID:12540846, PMID:19615750, PMID:37852260
• C3 wird hauptsächlich in der Leber produziert und in das Plasma sezerniert, aber auch Adipozyten produzieren und setzen C3 frei, wodurch das Komplementsystem mit dem Stoffwechsel verknüpft wird.
• Das Protein durchläuft umfangreiche posttranslationale Modifikationen, darunter Disulfidbindungen, Glykosylierung, Phosphorylierung und die Spaltung an basischen Aminosäureresten zur Erzeugung aktiver Fragmente.
• Genetische Varianten von C3 stehen mit der altersbedingten Makuladegeneration, dem atypischen hämolytisch-urämischen Syndrom und anderen Immunerkrankungen in Zusammenhang, was seine klinische Bedeutung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (AS 1364–1663) des humanen und murinen C3 und umfasst einen Teil der C345C-Domäne; diese Region ist sowohl im intakten Vorläuferprotein als auch in den Fragmenten C3b/iC3b/C3d vorhanden.
• Für den Western Blot (WB) sollten reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, um den Vorläufer mit ~186 kDa oder die Alpha-Kette mit ~110 kDa nachzuweisen; eine Validierung in geeigneten Proben wie humanem Plasma, Serum oder kultivierten Hepatozyten wird empfohlen.
• Im ELISA kann der Antikörper zum Einfangen oder Nachweisen von nativem C3 aus biologischen Flüssigkeiten von Mensch, Maus oder Ratte geeignet sein; die optimale Verdünnung und die Pufferbedingungen sollten jedoch empirisch bestimmt werden.
• Da C3 in großer Menge vorhanden und stark konserviert ist, sollten geeignete Kontrollen eingesetzt werden, um die Spezifität zu bestätigen, insbesondere bei der Arbeit mit eng verwandten Mitgliedern der Alpha-2-Makroglobulin-Familie.

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