Anti-COMP polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P49747

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von COMP

• Cartilage oligomeric matrix protein (COMP), auch bekannt als Thrombospondin-5 (TSP5), ist ein pentameres Glykoprotein aus der Familie der Thrombospondine. Es spielt eine entscheidende Rolle für die strukturelle Integrität des Knorpels durch die Interaktion mit Kollagenen und Fibronectin in der extrazellulären Matrix (ECM).
• COMP vermittelt die Adhäsion von Chondrozyten an die ECM durch Bindung an Integrin-Rezeptoren der Zelloberfläche und beeinflusst dadurch das Zellverhalten und die Gewebehomöostase. Diese Interaktion wird mit der Pathogenese der Osteoarthritis in Verbindung gebracht. Verwandte Referenzen: PMID:16051604 PMID:16542502
• Es wirkt als potenter Apoptose-Suppressor in primären Chondrozyten und transformierten Zellen, indem es die Caspase-3-Aktivierung blockiert und Proteine der Inhibitor-of-Apoptosis (IAP)-Familie wie BIRC2, BIRC3, BIRC5 und XIAP hochreguliert. Verwandte Referenzen: PMID:17993464
• In vaskulären glatten Muskelzellen (VSMCs) ist COMP für die Erhaltung eines kontraktilen/differenzierten Phänotyps durch die Interaktion mit Integrin α7 unerlässlich. Diese Funktion ist sowohl unter physiologischen als auch pathologischen Bedingungen entscheidend.
• Subzellulär wird COMP sezerniert und ist im extrazellulären Raum sowie in der ECM lokalisiert. Es wird reichlich in Chondrozyten exprimiert, zusätzlich kommt es in Knochen, Sehnen, Bändern, Synovium und Blutgefäßen vor. Die Expression steigt bei fortgeschrittener Osteoarthritis in der Nähe von Knorpeldefekten an.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen und enthält EGF-ähnliche Domänen, eine Coiled-Coil-Region und mehrere Kalziumbindungsstellen. Posttranslationale Modifikationen umfassen die Bildung von Disulfidbindungen und Glykosylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 20–160 des humanen COMP, einer Region in der Nähe der N-terminalen Pentamerisierungsdomäne. Dieses Design führt typischerweise zu Antikörpern, die sowohl vollständiges COMP als auch alle verarbeiteten Formen erkennen, die dieses Epitop enthalten.
• Für Western Blot (WB) ist unter reduzierenden Bedingungen eine Bande bei ca. 83 kDa zu erwarten. Aufgrund der pentameren Struktur und der umfangreichen Glykosylierung wird jedoch die Verwendung geeigneter Molekulargewichtsmarker und Reduktionsmittel empfohlen.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunozytochemie (IF/ICC) ist COMP überwiegend extrazellulär lokalisiert, daher ist eine Permeabilisierung möglicherweise nicht erforderlich, jedoch wird eine Optimierung für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Fixierungsmethode empfohlen.
• Bei ELISA sorgt die polyklonale Natur für eine robuste Detektionsempfindlichkeit, jedoch kann die Paarung mit einem monoklonalen Capture-Antikörper die Spezifität in Sandwich-Assays verbessern. Validieren Sie den Assay im relevanten Probensystem (z. B. Synovialflüssigkeit, Chondrozytenlysate).
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte macht diesen Antikörper geeignet für translationsorientierte Studien an Nagetier-Modellen für Osteoarthritis und kardiovaskuläre Erkrankungen. Bestätigen Sie gewebespezifische Expressionsmuster in Ihrem experimentellen Modell.

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