Anti-Kollagen I/COL1A2 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P08123

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Kollagen-alpha-2(I)-Kette

• Die Kollagen-alpha-2(I)-Kette ist eine Untereinheit von Typ-I-Kollagen, dem häufigsten fibrillären Kollagen im menschlichen Körper, das Bindegeweben Zugfestigkeit verleiht.
• Zusammen mit zwei alpha-1(I)-Ketten bildet sie das heterotrimere Typ-I-Prokollagen-Molekül, das eine proteolytische Verarbeitung durchläuft, um sich zu reifen Kollagenfibrillen zusammenzulagern.
• Typ-I-Kollagen ist eine wichtige strukturelle Komponente der extrazellulären Matrix in Haut, Knochen, Sehnen, Bändern und anderen Bindegeweben, wo es sich zu Fibrillen organisiert, die in Knochen mit Calciumhydroxylapatit mineralisiert sind.
• Das Protein wird als Präproprotein mit einem Signalpeptid synthetisiert, und die reife Kette wird in den extrazellulären Raum sezerniert, was zur supramolekularen Assembly von Kollagenfasern beiträgt.
• Gewebsspezifische Expression: hoch exprimiert in Sehnen, Bändern und Knochen, wobei die Fibrillenorganisation für die biomechanischen Eigenschaften entscheidend ist; Mutationen in COL1A2 verursachen Osteogenesis imperfecta und Ehlers-Danlos-Syndrom.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Hydroxylierung von Prolin- und Lysinresten, Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken, die für die Stabilität der Tripelhelix und die Vernetzung von Fibrillen unerlässlich sind.
• Das Protein enthält eine große Tripelhelix-Domäne mit charakteristischen Gly-X-Y-Wiederholungen, wobei X oft Prolin und Y oft Hydroxyprolin ist, und spielt eine Rolle bei der Zelladhäsion über Integrinbindungsstellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der C-terminalen Region (aa 1161-1260) von humanem COL1A2, das sowohl die Pro-Form als auch das reife Kollagen erkennen kann; validieren Sie dies in Ihrem Probensystem.
• Für den Western Blot verwenden Sie reduzierende SDS-PAGE-Bedingungen, um Kollagen-Trimer zu dissoziieren; beachten Sie, dass das theoretische Molekulargewicht der Pro-alpha-2-Kette ~129 kDa beträgt, aber reife verarbeitete Formen kleiner erscheinen können.
• Bei der Durchführung von Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie bedenken, dass Kollagen sezerniert wird; wenn Sie intrazelluläres Prokollagen anfärben, fügen Sie Permeabilisierungsschritte hinzu und führen Sie eine Kolokalisierung mit ER/Golgi-Markern durch.
• ELISA-Anwendungen können verwendet werden, um lösliche Kollagenfragmente oder sezerniertes Kollagen in Zellkulturüberständen nachzuweisen; optimieren Sie die Beschichtungs- und Nachweisbedingungen für Ihre Matrix.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus und Ratte, was translationswissenschaftliche Studien in Tiermodellen für Fibrose, Knochenerkrankungen und Wundheilung unterstützt.

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