Anti-Kollagen I/COL1A1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P02452

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Kollagen I/COL1A1

• Die Kollagen-alpha-1(I)-Kette (COL1A1) ist eine Hauptkomponente von Typ-I-Kollagen, dem am häufigsten vorkommenden fibrillären Kollagen bei Wirbeltieren. Sie gehört zur Familie der Gruppe-I-Kollagene.
• Typ-I-Kollagen ist ein Heterotrimer, der aus zwei alpha-1(I)-Ketten und einer alpha-2(I)-Kette besteht und das primäre strukturelle Element der extrazellulären Matrix (EZM) im Bindegewebe bildet.
• Das Protein wird in den extrazellulären Raum sezerniert und in der EZM abgelagert, wo es umfangreiche posttranslationale Modifikationen durchläuft, darunter Hydroxylierung, Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, um sich zu reifen Fibrillen zusammenzulagern.
• Die Gewebeverteilung konzentriert sich hauptsächlich auf Sehnen, Bänder und Knochen; im Knochen werden die Kollagenfibrillen mit Calciumhydroxyapatit mineralisiert, was Zugfestigkeit und strukturelle Integrität bietet.
• Alternatives Spleißen und proteolytische Verarbeitung erzeugen mehrere Isoformen; Mutationen in COL1A1 sind mit Bindegewebserkrankungen wie Osteogenesis imperfecta, Ehlers-Danlos-Syndrom und bestimmten Formen des Zwergwuchs assoziiert.
• Zusätzliche annotierte Merkmale umfassen Metallbindung (Calcium), phosphorylierte Reste und eine Modifikation mit Pyrrolidoncarbonsäure am N-Terminus, was die komplexe Regulation seiner Reifung und Funktion widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Resten 1151–1250 von menschlichem COL1A1 (NP_000079.2) zugeordnet ist, einer Region nahe des C-Terminus. Dieses Design kann die Erkennung der vollständigen Prokollagen- oder reifen Kollagenketten je nach Probenaufbereitung begünstigen.
• Für den Western Blot wird eine Bande um 139 kDa erwartet; reduzierende Bedingungen können zur Auflösung von Kollagenmonomeren beitragen, während nicht-reduzierende Bedingungen höherwertige Oligomere erhalten. In Gewebelysaten sollte eine Kollagenase-Vorbehandlung in Betracht gezogen werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) und der Immunhistochemie (IHC-P) ist Kollagen überwiegend extrazellulär gelegen; eine ausreichende Permeabilisierung (z. B. Triton X-100) und Antigen-Retrieval (für Paraffinschnitte) können erforderlich sein. Eine Co-Färbung mit EZM-Markern oder der Nachweis in entkalkten Knochenschnitten kann eine zusätzliche Validierung bieten.
• Für ELISA-Anwendungen können direkte oder Sandwich-Formate erkundet werden. Eine Peptidbeschichtung oder der Capture durch einen zweiten Antikörper kann die Empfindlichkeit bei der Arbeit mit komplexen biologischen Matrices wie Serum oder Gewebeextrakten verbessern.

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