Anti-COL9A1-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P20849

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: COL9A1-Funktion und -Lokalisierung

• COL9A1 kodiert die Alpha-1-Kette von Kollagen Typ IX, ein fibrillenassoziiertes Kollagen mit unterbrochenen Tripelhelices (FACIT), das eine strukturelle Komponente des hyalinen Knorpels und des Glaskörpers des Auges ist.
• Kollagen-Typ-IX-Moleküle sind Heterotrimere, die aus α1(IX)-, α2(IX)- und α3(IX)-Ketten bestehen, und sie assoziieren mit Kollagen-Typ-II-Fibrillen, was wahrscheinlich zur Integrität und Organisation der Extrazellularmatrix beiträgt.
• COL9A1 unterliegt alternativem Spleißen und enthält mehrere Domänen, einschließlich kollagener und nicht-kollagener Regionen, die für seine Interaktion mit anderen Matrixkomponenten wesentlich sind.
• Das Protein wird sezerniert und im extrazellulären Raum und in der Matrix lokalisiert, wo es an der Assembly und Stabilisierung von Knorpel- und Glaskörperstrukturen teilnimmt.
• Posttranslationale Modifikationen wie Hydroxylierung, Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung sind entscheidend für seine Stabilität und Funktion.
• Mutationen in COL9A1 sind mit Skelettdysplasien und Bindegewebserkrankungen verbunden, einschließlich des Stickler-Syndroms (gekennzeichnet durch okuläre, auditive und artikuläre Anomalien) und multipler epiphysärer Dysplasie, was seine klinische Bedeutung unterstreicht.
• Das Protein enthält ein Signalpeptid und Zinkbindungsstellen, und seine reife Form ist ein sezerniertes Glykoprotein.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses polyklonalen Antikörpers verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das den Aminosäuren 20–270 von menschlichem COL9A1 entspricht und einen Teil der nicht-kollagenen N-terminalen Domäne abdeckt, was möglicherweise Spezifität für die α1(IX)-Kette bietet.
• Für den Western Blot (WB) wird eine Bande um 92 kDa für das全长-COL9A1 in menschlichen Knorpel- oder Glaskörperproben erwartet; aufgrund von alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen können jedoch zusätzliche Banden oder Verschiebungen im Molekulargewicht beobachtet werden.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Ratten-COL9A1, was darauf hindeutet, dass er in Rattenmodellen verwendet werden kann; validieren Sie die Reaktivität in relevanten Gewebelysaten oder rekombinanten Systemen.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie die Verwendung von gereinigtem rekombinantem COL9A1 als Beschichtungsantigen oder Fangstandard in Betracht ziehen und eine geeignete Optimierung der Antikörperverdünnung und Detektionsbedingungen durchführen.
• Fügen Sie immer geeignete positive (Knorpelextrakte, rekombinantes Protein) und negative Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen und den Hintergrund zu minimieren.

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