Anti-COL4A5 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P29400

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: COL4A5-Funktion und Lokalisierung

• Die Typ-IV-Kollagen-Alpha-5-Kette fungiert als Hauptstrukturkomponente der glomerulären Basalmembranen (GBM) und bildet ein "Hühnerdraht"-Netzwerk mit Lamininen, Proteoglykanen und Entactin/Nidogen.
• Das Protein wird sezerniert und lokalisiert im extrazellulären Raum, der extrazellulären Matrix und den Basalmembranen.
• Isoform 2 zeigt gewebespezifische Expression in der Niere.
• COL4A5 ist am Alport-Syndrom beteiligt, einer genetischen Erkrankung, die durch fortschreitende Nierenerkrankung, sensorineurale Schwerhörigkeit und Augenanomalien gekennzeichnet ist.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Hydroxylierung und Glykosylierung, und bildet Disulfidbrücken.
• Enthält repetitive kollagene Domänen, die für Typ-IV-Kollagene typisch sind und zur Bildung von Tripelhelix-Strukturen beitragen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Aminosäuren 1462-1691) des humanen COL4A5, die innerhalb der NC1-Domäne liegt. Diese Domäne ist an der Protomer-Assemblierung beteiligt und kann in nativen Basalmembran-Extrakten gut präsentiert sein.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 161 kDa. Verwenden Sie ein Polyacrylamidgel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6-8 %), um den Transfer dieses hochmolekularen Proteins zu erleichtern, und erwägen Sie längere Transferzeiten.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie lokalisiert COL4A5 in Basalmembranen. Für eine optimale Färbung verwenden Sie gefrorene oder paraffineingebettete Gewebeschnitte. Für Paraffinschnitte können Antigen-Retrieval-Methoden erforderlich sein; konsultieren Sie die Literatur für spezifische Protokolle.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Verwendung von rekombinantem COL4A5-Protein oder Basalmembran-Extrakten als Beschichtungsantigen vorteilhaft sein. Validieren Sie die Antikörperspezifität mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.

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