Anti-COL2A1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P28481

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: COL2A1-Funktion und -Lokalisierung

• Die Kollagen-alpha-1(II)-Kette (COL2A1), auch bekannt als Alpha-1-Typ-II-Kollagen, ist ein wichtiges fibrilläres Kollagen und das vorherrschende Kollagen im Knorpel. Sie wird durch das Col2a1-Gen bei Mäusen kodiert und repräsentiert die homotrimere Form des Typ-II-Kollagens.
• Typ-II-Kollagen ist für die normale embryonale Entwicklung des Skeletts unerlässlich, unterstützt das lineare Wachstum und bietet das strukturelle Gerüst, das es dem Knorpel ermöglicht, Druckkräften zu widerstehen – eine Eigenschaft, die für die Gelenkfunktion und die Gewebeintegrität entscheidend ist.
• Das Protein ist ein Mitglied der Kollagen-Superfamilie, die durch ihre dreihelixartige Domäne charakterisiert ist, die aus wiederkehrenden Gly-X-Y-Motiven besteht, wobei X oft Prolin und Y Hydroxyprolin ist, was ihm eine einzigartige mechanische Stabilität verleiht.
• COL2A1 wird sezerniert und in die extrazelluläre Matrix von knorpeligen Geweben lokalisiert, wo es mit anderen Matrixkomponenten wie Proteoglykanen und minoritären Kollagenen interagiert, um ein hochorganisiertes Netzwerk zu bilden.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Hydroxylierung, Glykosylierung und der Bildung von Disulfidbrücken, sind für die Stabilität seiner Tripelhelix und die Assembly in reife Kollagenfibrillen kritisch. Das Protein bindet auch Kalzium, was die Fibrillenbildung und die Matrixmineralisation beeinflussen kann.
• Die Gewebespezifität ist auf den Knorpel beschränkt, wodurch COL2A1 ein Schlüsselmarker für die Chondrozytendifferenzierung und die Knorpelbiologie ist. Mutationen oder abnormale Expression werden mit Skelettdysplasien und Arthrose in Verbindung gebracht.
• Das Protein unterliegt einem alternativen Spleißen, wodurch Isoformen entstehen, die unterschiedliche Rollen bei Entwicklung und Krankheit spielen können, wobei die Volllängenform im gesunden Knorpel am häufigsten vorkommt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das den Aminosäuren 1331-1487 der C-terminalen Region von COL2A1 der Maus entspricht, was eine Reaktivität mit dem nativen Protein in Maus- und Rattenproben verleihen kann; es wird empfohlen, die Spezifität für die betreffenden Spezies zu verifizieren.
• Für Western Blot (WB) unter reduzierenden Bedingungen wird eine Bande im Bereich von 132-142 kDa (ca. 142 kDa, basierend auf der Maussequenz vorhergesagt) in Knorpellysaten erwartet; beachten Sie, dass Typ-II-Kollagen höherwertige Oligomere bilden kann, sodass eine Optimierung der Probenvorbereitung und der Ladekontrollen empfohlen wird.
• Die ELISA-Leistung kann durch die Verwendung desselben rekombinanten Proteins als Beschichtungsantigen verbessert werden; Benutzer sollten die Antikörpertitration und die Detektionsbedingungen in ihrem spezifischen Assay-Format validieren.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, können leichte Chargen-zu-Chargen-Schwankungen auftreten; es ist ratsam, die Empfindlichkeit und Kreuzreaktivität in Pilotexperimenten vor der großflächigen Nutzung zu bestätigen.

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