Anti-COL1A1-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P02452

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: COL1A1-Funktion und -Lokalisierung

• Encodiert die Alpha-1-Kette von Typ-I-Kollagen, ein fibrilläres Gruppen-I-Kollagen, das für die Architektur der extrazellulären Matrix unerlässlich ist.
• Hauptstrukturprotein in Bindegeweben, bildet Fibrillen in Sehnen, Bändern und Knochen; im Knochen mit Kalziumhydroxylapatit mineralisiert.
• Sekretiertes Protein, das im extrazellulären Raum und in der extrazellulären Matrix lokalisiert ist.
Unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Hydroxylierung, Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung.
• Mutationen sind mit Osteogenesis imperfecta, Ehlers-Danlos-Syndrom, Osteoporose und bestimmten Formen von Zwergwuchs verbunden.
• Bindet Kalzium und Metallionen und trägt zur Matrixmineralisierung und den mechanischen Eigenschaften bei.
• Zeichnet sich durch ein Signalpeptid, eine dreihelixartige Domäne und ein C-terminales Propeptid aus; besitzt eine Prolidincarbonsäure-Modifikation.
• Hohe Häufigkeit in Knochen, Haut und Sehnen; wird als Referenz für Proteomik und Strukturstudien verwendet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1359–1464 innerhalb der dreihelixartigen Domäne, einer über Arten hinweg konservierten Region, was die berichtete Kreuzreaktivität mit Mensch und Maus unterstützt.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 139 kDa; verwenden Sie eine geeignete Gel-Porosität (z. B. 6 % SDS-PAGE) und verlängerte Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC sollte eine Permeabilisierung in Betracht gezogen werden, um intrazelluläre Prokollagen-Pools zu erreichen, oder ohne Permeabilisierung durchgeführt werden, um sezernierte Kollagene der extrazellulären Matrix nachzuweisen.
• Die ELISA-Anwendung kann zur Quantifizierung löslicher Kollagenfragmente oder zur Überwachung des Matrixumsatzes geeignet sein; optimieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen.
• Aufgrund der natürlichen Häufigkeit von Typ-I-Kollagen sollten der Primärantikörper und die Probenbeladung sorgfältig titriert werden, um eine Signalsättigung oder Hintergrund zu vermeiden.

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