Anti-COL11A1-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P12107

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: COL11A1-Funktion und -Lokalisierung

• Die Kollagen-alpha-1(XI)-Kette ist eine Komponente des Typ-XI-Kollagens, eines minoritären fibrillären Kollagens, das für die strukturelle Integrität der Knorpel-extrazellulären Matrix unerlässlich ist.
• Spielt eine wichtige Rolle bei der Fibrillogenese durch Kontrolle des lateralen Wachstums von Kollagen-II-Fibrillen und reguliert dadurch den Fibrillendurchmesser.
• Lokalisiert subzellulär im sezernierten extrazellulären Raum und in der Matrix, was seiner Rolle beim Gewebegerüst entspricht.
• Gewebsspezifität: Hoch exprimiert in Knorpel, Plazenta und einigen Tumor- oder virally transformierten Zelllinien. Isoformen, die Exon IIA oder IIB verwenden, überwiegen im Knorpel, während Isoformen, die nur Exon IIB verwenden, in der Sehne gefunden werden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Hydroxylierung von Prolin- und Lysinresten, Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken, die für die Stabilität der Tripelhelix und die supramolekulare Assemblierung kritisch sind.
• Enthält kollagene (Gly-X-Y)-Wiederholungen und nicht-kollagene Domänen, wobei alternatives Spleißen mehrere Isoformen erzeugt, die die Matrixinteraktionen feinabstimmen.
• Genetische Varianten in COL11A1 sind mit dem Stickler-Syndrom, dem Marshall-Syndrom und nicht-syndromalem Hörverlust verbunden, was seine Rolle bei der Entwicklung von Auge, Ohr und Skelett unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 260–430 innerhalb der Tripelhelix-Region, die über Isoformen hinweg konserviert ist; die polyklonale Natur kann sowohl Volllängen- als auch gespleißte Varianten erkennen.
• Für Western Blots sollte ein reduzierendes oder nicht-reduzierendes Gelsystem in Betracht gezogen werden, da Disulfidbrücken in den nicht-kollagenen Domänen die Wanderung beeinflussen können; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~181 kDa, aber die tatsächliche Wanderung kann aufgrund posttranslationaler Modifikationen abweichen.
• In der Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Methoden wie enzymatische Verdauung (z. B. Pepsin) oder hitzeinduziertes Retrieval die Detektion von Kollagenepitopen in paraffineingebetteten Knorpelschnitten verbessern.
• Für ELISA werden vorläufige Checkerboard-Titrationen mit rekombinantem COL11A1 oder Gewebeextrakten empfohlen, um optimale Beschichtungs- und Nachweisbedingungen zu ermitteln.
• Bei der Arbeit mit Nagetierproben sollte die Kreuzreaktivität zunächst validiert werden, da es potenzielle Unterschiede in den Isoform-Expressionsmustern zwischen menschlichen, murinen und rattengeweblichen Proben geben kann.

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