Anti-COL11A1 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P12107

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von COL11A1

• COL11A1 kodiert die Alpha-1-Kette von Kollagen Typ XI, einem geringfügigen fibrillären Kollagen, das eine entscheidende Rolle bei der Assemblierung und Erhaltung der extrazellulären Knorpelmatrix spielt, indem es das laterale Wachstum von Kollagen-II-Fibrillen reguliert.
• Das Protein wird sezerniert und lokalisiert im extrazellulären Raum und der extrazellulären Matrix (UniProt: P12107).
• Es zeigt gewebespezifische Expression: reichlich vorhanden in Knorpel, Plazenta und einigen Tumor- oder viral transformierten Zelllinien. alternatives Spleißen erzeugt Isoformen mit Exon IIA oder IIB im Knorpel, während die Sehne nur die Exon-IIB-Isoform exprimiert.
• COL11A1 erfährt umfangreiche posttranslationale Modifikationen, einschließlich Glykosylierung und Hydroxylierung, und enthält Disulfidbindungen und kalziumbindende Stellen, die zu seiner strukturellen Stabilität beitragen.
• Mutationen in COL11A1 sind mit einem Spektrum von Bindegewebserkrankungen verbunden, darunter das Stickler-Syndrom, nicht-syndromale Taubheit (DFNA37), Katarakt, Zwergwuchs und ektodermale Dysplasie.
• Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 181 kDa, aber mehrere Isoformen und Verarbeitungsprozesse erzeugen Varianten im Bereich von 167 bis 182 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer spezifischen Peptidsequenz (Aa 301–400); bestätigen Sie die Konservierung dieses Epitops, wenn Sie die Anwendung auf andere Spezies oder Isoformen ausweiten.
• Verwenden Sie für Western Blotting ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8 %) und optimierte Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine; mehrere Banden können die Isoformvielfalt widerspiegeln.
• In der Immunfluoreszenz/Immunozytochemie schließen Sie Permeabilisierungsschritte ein, um das in der extrazellulären Matrix lokalisierte Kollagen zugänglich zu machen, und validieren Sie mit matrixspezifischen Markern.
• Berücksichtigen Sie für ELISA aufgrund der großen glykosylierten Natur des Antigens ein Sandwich-Format mit einem passenden Paar oder optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen.
• Die Probenvorbereitung für die Kollagenextraktion aus Gewebe profitiert oft von einer Behandlung mit Pepsin oder anderen Proteasen, um intakte Fibrillen freizusetzen; beachten Sie, dass dies die Epitope verändern kann.

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