Anti-Gerinnungsfaktor III/Gewebefaktor Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P13726

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Gerinnungsfaktor III/Gewebefaktor

• Gewebefaktor (TF), auch bekannt als Gerinnungsfaktor III oder Thromboplastin, ist ein transmembranes Glykoprotein, das als primärer Initiator der extrinsischen Blutgerinnungskaskade dient.
• TF bildet einen hochaffinen Komplex mit zirkulierendem Faktor VII (FVII) oder seiner aktivierten Form (FVIIa); der TF:FVIIa-Komplex aktiviert proteolytisch Faktor IX zu IXa und Faktor X zu Xa, was zur Thrombinbildung und Fibrinklötchenbildung führt.
• Kodiert durch das F3-Gen, wird TF als membranständiges Protein mit einer großen extrazellulären Domäne, einer einzelnen Transmembranhelix und einem kurzen cytoplasmatischen Schwanz exprimiert; alternatives Spleißen kann lösliche Isoformen erzeugen.
• Das Protein ist hauptsächlich in der Plasmamembran lokalisiert, aber auch eine sekretierte Form wurde nachgewiesen, was mit seiner Rolle bei der zelloberflächenständigen Assemblierung von Gerinnungskomplexen übereinstimmt.
• Die gewebespezifische Expression ist in Geweben wie Lunge, Plazenta und Bauchspeicheldrüse am höchsten, wo es wahrscheinlich zum hämostatischen Schutz und zur schnellen Gerinnselbildung bei Gefäßverletzungen beiträgt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Palmitoylierung, die alle zur korrekten Faltung, Stabilität und Membranverankerung beitragen.
• Schlüsselwörter von UniProt heben seine Beteiligung an Blutgerinnung, Hämostase und seine strukturellen Merkmale als membrangebundenes Lipoprotein hervor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 120–251 des humanen TF, was einem Teil der extrazellulären Domäne entspricht; diese Region wird wahrscheinlich sowohl den vollständigen membranständigen TF als auch abgespaltene lösliche Fragmente erkennen.
• Für Western Blot kann ein Band beobachtet werden, das mit dem vorhergesagten Molekulargewicht von 33 kDa kompatibel ist; erwägen Sie die Verwendung reduzierender und nicht-reduzierender Bedingungen, um Disulfid-verknüpfte Komplexe zu beurteilen.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie ist TF an der Plasmamembran zu erwarten; für die intrazelluläre Färbung von neu synthetisiertem Protein im sekretorischen Weg kann eine geeignete Permeabilisierung erforderlich sein.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-TF; eine Validierung in den relevanten Spezies und Gewebetypen (z.B. Lunge, Plazenta) wird empfohlen, um die Detektion zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Verwendung als Capture- oder Detektionsantikörper untersucht werden; optimale Verdünnungen sollten empirisch unter Verwendung eines gereinigten Antigens oder einer bekannten positiven Probe ermittelt werden.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz für kritische quantitative Assays überprüft werden.

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