Anti-CNOT1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - A5YKK6

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CNOT1-Funktion und -Lokalisierung

• CNOT1 ist die große Gerüstuntereinheit des CCR4-NOT-Komplexes, einer wichtigen zellulären mRNA-Deadenylase, die am Abbau von Bulk-mRNA, miRNA-vermittelter Repression und Translationskontrolle beteiligt ist.
• Das Protein fungiert als transkriptioneller Repressor und hemmt die ligandabhängige transkriptionelle Aktivierung durch nukleäre Rezeptoren.
• CNOT1 vermittelt die Rekrutierung des CCR4-NOT-Komplexes an miRNA-Ziele durch Assoziation mit TNRC6 (GW182)-Proteinen und verbindet ihn so mit dem RISC-Komplex.
• Es ist am Abbau von mRNAs mit AU-reichen Elementen (ARE) beteiligt, wahrscheinlich durch Interaktion mit ZFP36.
• Subzellulär lokalisiert CNOT1 im Zytoplasma, in P-Bodies und im Zellkern, was mit seinen Rollen im mRNA-Abbau und der Transkriptionsregulation übereinstimmt.
• Das Protein wird stark im Gehirn, Herz, Thymus, Milz, Niere, Leber, Plazenta und Lunge exprimiert, mit schwächerer Expression in Skelettmuskel und Kolon.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, und krankheitsassoziierte Varianten wurden mit Autismus-Spektrum-Störung, Holoprosenzephalie und intellektueller Beeinträchtigung in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 2137–2376 innerhalb der C-terminalen Region von humanem CNOT1. Überprüfen Sie die Antikörperspezifität in Ihrem System, da die Epitoperkennung zwischen Isoformen variieren kann.
• Für Western Blot beachten Sie, dass CNOT1 ein hohes Molekulargewicht (~267 kDa) hat. Verwenden Sie ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Prozentsatz (z.B. 6%) und verlängerte Transferzeiten für einen vollständigen Proteintransfer.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC ist sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Anfärbung zu erwarten, mit möglicher Anreicherung in P-Bodies. Co-Lokalisierungsstudien mit P-Body-Markern können aufschlussreich sein.
• Die Kreuzreaktivität ist für humanes und murines CNOT1 bestätigt. Wenn Sie mit anderen Spezies arbeiten, validieren Sie die Kreuzreaktivität experimentell.

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