Anti-Clusterin Kaninchen Monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P10909

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Clusterin

• Wirkt als ATP-unabhängiges extrazelluläres Chaperon, das die Aggregation von nicht-nativen und stressinduzierten Blutplasmaproteinen verhindert und die Bildung von Amyloidfibrillen durch Proteine wie APP, SNCA und Lysozym hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:11123922 PMID:19535339 PMID:12176985 PMID:17260971 PMID:12047389 PMID:17407782 PMID:17412999

• Hält partiell ungefaltete Klientenproteine in einem faltungsfähigen Zustand für die anschließende Rückfaltung durch ATP-abhängige Chaperone wie HSPA8/HSC70; die Bindung an Zelloberflächenrezeptoren löst die Internalisierung und den lysosomalen oder proteasomalen Abbau des Chaperon-Klienten-Komplexes aus. Verwandte Referenzen: PMID:11123922 PMID:21505792

• Hemmt den terminalen Komplementweg, indem es die Polymerisation der C9-Porenkomponente des Membranangriffskomplexes (MAC) verhindert und dadurch Zellen vor komplementvermittelter Cytolyse schützt. Verwandte Referenzen: PMID:2780565 PMID:1903064 PMID:2601725

• Intrazelluläre Formen haben eine doppelte Rolle bei der Apoptoseregulierung: mitochondriales Clusterin unterdrückt die BAX-vermittelte Cytochrom-c-Freisetzung und stabilisiert die mitochondriale Membranintegrität über HSPA5, wohingegen die Interaktion mit BCL2L1 BAX aktivieren kann, um den Zelltod zu fördern; die sezernierte Form beeinflusst die intrinsische Apoptose oder TNF-induzierte NF-kappa-B nicht. Verwandte Referenzen: PMID:16113678 PMID:17689225 PMID:22689054 PMID:21567405 PMID:24073260

• Moduliert das Ubiquitin-Proteasom-System durch Interaktion mit SCF E3-Ligase-Komplexen, um die Ubiquitinierung und den Abbau von Zielen wie COMMD1 und IKBKB zu fördern, wodurch die transkriptionelle Aktivität von NF-kappa-B reguliert wird. Verwandte Referenzen: PMID:20068069 PMID:12882985

• Lokalisierung: sezerniert in Körperflüssigkeiten (Blutplasma, Liquor, Milch, Samenplasma) und intrazellulär im Zytoplasma, Zellkern, Mitochondrien, Endoplasmatischen Retikulum und zytoplasmatischen Vesikeln nachweisbar.

• Ubiquitär exprimiert mit den höchsten Gehalten in Gehirn, Hoden, Ovar, Leber und Bauchspeicheldrüse; auch in Niere, Herz, Milz und Lunge nachweisbar.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 314-449 der Clusterin-Alpha-Kette; bestätigen Sie die Reaktivität sowohl mit dem volllängigen Vorläufer als auch der prozessierten Alpha-Kette in Ihrem Assaysystem.
• Beim Western Blot wird der volllängige Clusterin-Vorläufer mit 52 kDa prognostiziert; unter reduzierenden Bedingungen können auch die gespaltenen Alpha- (~40 kDa) und Beta-Ketten (~35 kDa) beobachtet werden. Optimieren Sie Probenvorbereitung und Gelbedingungen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) validieren Sie Antigen-Retrieval-Methoden und Gewebefixierungsbedingungen und schließen Sie geeignete positive und negative Gewebekontrollen ein.
• Dieser Antikörper ist mit ELISA kompatibel; erwägen Sie die Paarung mit einem Detektionsantikörper, der auf ein anderes Epitop abzielt, für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA.

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