Anti-Clusterin Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P10909

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Clusterin-Funktion und -Lokalisierung

• Clusterin (Apolipoprotein J, TRPM-2, SGP-2) ist ein multifunktionales Glykoprotein, das durch das CLU-Gen kodiert wird; es existiert in sezernierter und intrazellulärer Form aufgrund von alternatives Spleißen und posttranslationaler Prozessierung.
• Als extrazelluläres Chaperon verhindert Clusterin die Aggregation von nicht-nativen und stress-denaturierten Proteinen, hemmt die Bildung von Amyloidfibrillen und erhält teilweise entfaltete Proteine für die Rückfaltung durch andere Chaperone auf ATP-unabhängige Weise aufrecht. Verwandte Referenzen: PMID:11123922, PMID:19535339, PMID:12176985, PMID:17260971, PMID:12047389, PMID:17407782, PMID:17412999
• Die Bindung von Clusterin an Zelloberflächenrezeptoren löst die Internalisierung und lysosomale/proteasomale Degradation des Chaperon-Client-Komplexes aus. Verwandte Referenzen: PMID:21505792
• Es schützt Zellen vor komplementvermittelter Zytolyse, indem es die Assemblierung des Membranangriffskomplexes (MAC) durch Verhinderung der C9-Polymerisation hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:2780565, PMID:1903064, PMID:2601725
• Intrazelluläres Clusterin interagiert mit SCF-E3-Ligasen, um die Ubiquitinierung und proteasomale Degradation von Zielen wie COMMD1 und IKBKB zu fördern, und moduliert die NF-κB-Transkriptionsaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:20068069, PMID:12882985
• Eine mitochondriale Form unterdrückt die BAX-abhängige Cytochrom-c-Freisetzung und stabilisiert die mitochondriale Membranintegrität, um Apoptose zu hemmen. Verwandte Referenzen: PMID:16113678, PMID:17689225, PMID:22689054
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Sekretion in biologische Flüssigkeiten sowie Vorkommen im Zytoplasma, Zellkern, Mitochondrien, endoplasmatischen Retikulum und zytoplasmatischen Vesikeln.
• Clusterin ist ubiquitär exprimiert mit hohen Spiegeln in Gehirn, Hoden, Eierstöcken, Leber und Bauchspeicheldrüse; nachweisbar in Blutplasma, Liquor cerebrospinalis, Milch, Samenplasma und Kolonschleimhaut.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Aufgrund der polyklonalen Natur und der Verwendung eines rekombinanten Immunogens wird erwartet, dass dieser Antikörper sowohl Vorläufer- als auch reife Formen von Clusterin detektiert; führen Sie geeignete Kontrollen und Molekulargewichtsmarker mit.
• Für Western Blot wird die Optimierung von Blockierung und Antikörperverdünnung empfohlen; ziehen Sie sowohl reduzierende als auch nicht-reduzierende SDS-PAGE in Betracht, da Clusterin Disulfidbrücken enthält.
• Validieren Sie in der Immunhistochemie und Immunfluoreszenz mit bekannten positiven und negativen Gewebeproben; die Antigen-Demaskierung kann die Detektion in formalinfixierten, paraffineingebetteten Schnitten verbessern.
• Da Clusterin ein sezerniertes Glykoprotein ist, stellen Sie gründliches Waschen sicher, um hohen Hintergrund in serumhaltigen Proben zu reduzieren.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht die Verwendung in gängigen präklinischen Modellen; überprüfen Sie jedoch die Epitoperhaltung für quantitative Vergleiche.
• Titrieren Sie den Antikörper immer in Ihrem spezifischen Assaysystem, um die optimale Arbeitsverdünnung zu bestimmen.

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