Anti-CLOCK Rabbit Monoclonal Antibody für WB, ELISA - O15516

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CLOCK-Funktion und -Lokalisierung

• CLOCK ist eine Kernkomponente der zirkadianen Uhr und wirkt als transkriptioneller Aktivator, der die Expression von uhrgesteuerten Genen antreibt.
• Es bildet ein Heterodimer mit BMAL1 und bindet an E-Box-Motive (5'-CACGTG-3') in Genpromotoren. Das bevorzugte Bindungsmotiv ist 5'-CACGTGA-3', wobei CLOCK die 5'-CAC-3'-Halbstelle erkennt. Verwandte Referenzen: PMID:23229515
• CLOCK zeigt intrinsische Acetyltransferase-Aktivität und acetyliert Histone sowie Nicht-Histon-Proteine wie BMAL1, den Glukokortikoidrezeptor und ASS1, wodurch es die Chromatin-Remodellierung und Stoffwechselwege reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:21980503, PMID:28985504
• Subzellulär lokalisiert sich CLOCK im Zellkern, Zytoplasma und Cytosol und pendelt in einem zirkadianen Rhythmus zwischen den Kompartimenten.
• Es ist ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Spiegeln im Nucleus suprachiasmaticus (SCN) des Gehirns, in den Hoden und in der Skelettmuskulatur.
• Die CLOCK-Aktivität wird durch posttranslationale Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung, moduliert, die ihre Stabilität und transkriptionelle Funktion beeinflussen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 100-200 von humanem CLOCK entspricht. Diese Region wird als immunogen und für die Antikörperbindung zugänglich vorhergesagt.
• Für Western Blot wird eine Bande von ca. 95 kDa in Lysaten aus menschlichen, murinen und rattengeweblichen Proben erwartet. Die optimale Verdünnung und Blockierungsbedingungen sollten empirisch ermittelt werden.
• Im ELISA kann dieser Antikörper zum direkten Nachweis des Peptidantigens verwendet werden; geeignete positive und negative Kontrollen sollten einbezogen werden.
• Die Kreuzreaktivität mit murinem und rattigem CLOCK macht diesen Antikörper geeignet für In-vivo- und Ex-vivo-Studien zu zirkadianen Rhythmen in Nagetiermodellen.

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