Anti-CLEC4D Poliklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - Q8WXI8

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CLEC4D

• CLEC4D, auch bekannt als Dectin-3, CD368 und CLECSF8, ist ein Mitglied der C-Typ-Lektinfamilie, das als Mustererkennungsrezeptor (PRR) im angeborenen Immunsystem fungiert.
• CLEC4D erkennt schadstoffassoziierte molekulare Muster (DAMPs) und pathogenassoziierte molekulare Muster (PAMPs) von Bakterien und Pilzen, einschließlich α-Mannane auf Hyphen von Candida albicans und mykobakterielles Trehalose-6,6'-dimycolat (TDM). Verwandte Referenzen: PMID:23602766 PMID:23911656
• Nach Ligandenbindung bildet CLEC4D wahrscheinlich über CLEC4E (Mincle) einen Komplex mit der Fc-Rezeptor-Gammakette (FCER1G), was zur Phosphorylierung des ITAM-Motivs, zur SYK-CARD9-NF-κB-Aktivierung und anschließenden Reifung antigenpräsentierender Zellen mit Induktion von T-Helfer-1- und 17-Antworten führt. Verwandte Referenzen: PMID:23602766 PMID:23911656
• CLEC4D fungiert als endozytischer Rezeptor, der die Antigenaufnahme an Infektionsstellen für die Clearance oder die Prozessierung und Präsentation an T-Zellen erleichtern kann. Verwandte Referenzen: PMID:14971047
• Subzellulär lokalisiert sich CLEC4D als Transmembranprotein mit einer einzelnen Signal-Anker-Helix an der Zellmembran.
• Die Gewebeexpression erfolgt überwiegend in Monozyten und Makrophagen und kann durch Zytokine wie IL-6, IL-10, TNF und IFN-γ hochreguliert werden.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung, die zur strukturellen Stabilität und zu den Ligandenbindungseigenschaften beitragen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 39–215 von menschlichem CLEC4D (NP_525126.2); daher kann der polyklonale Antikörper die extrazelluläre Ligandenbindungsdomäne und potenziell die Stielregion erkennen. Bitte beachten Sie, dass Glykosylierung die Epitopzugänglichkeit beeinflussen kann.
• Für die Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~25 kDa, aber glykosylierte Formen können höher wandern. Verwenden Sie geeignete Positivkontrollen wie THP-1-Zellen, die mit Zytokinen (z. B. TNF oder IFN-γ) stimuliert wurden, um die CLEC4D-Expression zu erhöhen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF-P) wird erwartet, dass der Antikörper membranlokalisiertes CLEC4D nachweist. Permeabilisierung ist erforderlich, wenn das Epitop intrazellulär ist; andernfalls kann Oberflächenfärbung an lebenden, unfixierten Zellen evaluiert werden.
• Für ELISA stellen Sie sicher, dass das rekombinante Protein oder native Antigen korrekt beschichtet ist und berücksichtigen Sie die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Homologen bei der Gestaltung von Assays.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper sollte die Chargenkonsistenz überwacht werden, und die Spezifität kann anhand von CLEC4D-Knockout- oder Knockdown-Proben überprüft werden.

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