Anti-Cleaved Gasdermin D (N-Terminal) Rabbit Monoclonal Antibody für Pyroptose-Forschung - P57764

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Gasdermin D-Funktion und -Lokalisierung

• Vorstufe eines porenbildenden Proteins, das nach Spaltung durch entzündliche Caspasen ein N-terminales Fragment freisetzt, das an Membranen bindet, Poren bildet und die Pyroptose auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27281216
• Fördert die Pyroptose als Reaktion auf mikrobielle Infektionen und Gefahrensignale; wird durch CASP1, CASP4 oder CASP5 gespalten; transloziert zur Plasmamembran, bindet Lipide der inneren Blattschicht und bildet 10–15 nm Poren, wodurch die Freisetzung von reifem IL1B, IL18 und CASP7 ermöglicht wird. Verwandte Referenzen: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190 PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980 PMID:33472215 PMID:37198476
• Vermittelt die nicht-kanonische Inflammasom-Aktivierung als Reaktion auf zytosolisches LPS; bildet auch Poren in mitochondrialen Membranen, setzt mtDNA frei, und extrazelluläre N‑terminale Fragmente töten Bakterien direkt durch Lipidbindungsspezifität. Verwandte Referenzen: PMID:27281216
• Fungiert als Transkriptions-Coaktivator im Dünndarm nach Spaltung durch CASP3/CASP7; transloziert in den Kern, coaktiviert STAT1, um CIITA und MHC-Klasse II zu induzieren, und fördert die Tr1-Zell-vermittelte Nahrungstoleranz.
• Wird durch Papain-Allergen gespalten, was zur Porenbildung in der Plasmamembran und spezifischen Freisetzung von IL33 führt, was eine Typ-2-Entzündungsreaktion antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:35794369
• Wird in suprabasalen Zellen der Speiseröhre sowie im Isthmus/Hals, in der Grube und in der Drüse des Magens exprimiert, was eine bevorzugte Expression in differenzierten Zellen anzeigt.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zytosol, Inflammasom, Zellmembran, sezerniert, Mitochondrienmembran und Zellkern; posttranslationale Modifikationen umfassen Palmitoylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen überspannt die Spaltstelle Asp275; daher wird erwartet, dass der Antikörper selektiv das gespaltene N‑terminale Fragment und nicht das全长-GSDMD erkennt. Bestätigen Sie die Spezifität mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.
• Führen Sie für Western Blots Proben unter reduzierenden Bedingungen aus und detektieren Sie eine Bande um 30 kDa (N‑terminales Fragment). Validieren Sie mit Lysaten aus Zellen, die eine Pyroptose durchlaufen (z. B. LPS+ATP-Behandlung).
• Optimieren Sie bei der Immunfluoreszenz/ICC die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen. Das N‑terminale Fragment kann sich in pyroptotischen Zellen an der Plasmamembran oder den Mitochondrien lokalisieren.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie Sandwich-Paarungen mit einem Capture-Antikörper in Betracht ziehen, der ein anderes Epitop anzielt. Validieren Sie die Leistung mit rekombinanten GSDMD-Proteinen oder zellulärem Material.

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