Anti-Cleaved Caspase-8 (Asp384) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q14790

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Caspase-8-Funktion und Lokalisation

• Caspase-8 ist eine Thiolprotease, die als molekularer Schalter für Apoptose, Nekroptose und Pyroptose fungiert und essentiell ist, um Gewebeschäden während der Entwicklung und im Erwachsenenalter zu verhindern. Verwandte Referenzen: PMID:23516580 PMID:35338844 PMID:35446120
• Als Initiator-Caspase vermittelt sie die extrinsische Apoptose durch Bildung des Death-Inducing Signaling Complex (DISC) nach FAS/CD95- oder TNFRSF1A-Aktivierung, was zur Spaltung und Aktivierung der Effektor-Caspasen CASP3, CASP6, CASP7 und anderer führt. Verwandte Referenzen: PMID:8681376 PMID:8681377 PMID:9184224 PMID:8962078 PMID:9006941 PMID:16916640
• Es existieren mehrere Isoformen: Isoform 1 (Vollständige Länge), Isoform 5 und Isoform 7 sind weit verbreitet exprimiert; Isoformen, denen die katalytische Stelle fehlt, wirken als Inhibitoren der Caspasen-Kaskade. Verwandte Referenzen: PMID:12010809
• Das Protein lokalisiert im Zytoplasma, Zellkern und Zellfortsätzen wie Lamellipodien und wird an Tyr-380 phosphoryliert, um die Zellmigration unabhängig von der Proteaseaktivität zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:18216014 PMID:27109099
• Caspase-8 reguliert Nekroptose negativ, indem sie RIPK1 an Asp-324 spaltet und so die Kinaseaktivität und Entzündungsreaktionen begrenzt. Verwandte Referenzen: PMID:31827280 PMID:31827281
• Sie initiiert auch Pyroptose durch Spaltung von Gasdermin-C und Gasdermin-D und ist an der angeborenen Immunität beteiligt, indem sie N4BP1 stromabwärts von TLR3/4 inaktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:32929201 PMID:34012073
• Die höchste Expression wird in peripheren Blutleukozyten, Milz, Thymus und Leber beobachtet, mit niedrigeren Spiegeln im Gehirn, Hoden und Skelettmuskel.
• Schlüsselwörter umfassen: alternatives Spleißen, Zymogen, Thiolprotease, Krankheitsvariante und Wirt-Virus-Interaktion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 371–470 der humanen Caspase-8 (NP_203519.1), die die Region der großen Untereinheit nach Autospaltung an Asp384 umfasst; daher ist der Antikörper spezifisch für die gespaltene, aktivierte Form.
• Für den Western Blot wandert das Proenzym bei etwa 55 kDa, während die gespaltene große Untereinheit typischerweise bei etwa 43–45 kDa erscheint. Die Einbeziehung geeigneter positiver und negativer Kontrollen (z. B. mit Apoptose-Induktoren behandelte Zellen) wird empfohlen, um die Bandenidentität zu überprüfen.
• Die ELISA-Optimierung erfordert möglicherweise eine Titration der Antikörperkonzentration und eine sorgfältige Auswahl von Blockierungsmitteln, um den Hintergrund zu reduzieren; erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem Caspase-8-Protein oder Peptid als Standard.
• Die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt; validieren Sie bei beabsichtigten nicht-humanen Anwendungen im relevanten Probensystem.

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