Anti-Cleaved-Caspase 3 p12 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P42574

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Caspase-3-Funktion und Lokalisierung

• Caspase-3, auch bekannt als Apopain, CPP32, Yama oder SCA-1, ist eine Thiolprotease und eine wichtige Effektor-Caspase, die nach Aktivierung durch Initiator-Caspasen (CASP8, CASP9, CASP10) Apoptose ausführt.
  Verwandte Referenzen: PMID:18723680 PMID:20566630 PMID:23650375
• Nach der Aktivierung spaltet sie zahlreiche Substrate, darunter PARP1 an Asp216-Gly217, SREBPs, Caspasen-6, -7, -9 und IL18 und koordiniert so den zellulären Abbau.
  Verwandte Referenzen: PMID:10497198 PMID:16374543 PMID:7596430 PMID:37993714 PMID:9334240
• Über Apoptose hinaus trägt sie zur Pyroptose bei, indem sie Gasdermin-E (GSDME) spaltet, hemmt die Produktion von Typ-I-Interferon während einer Virusinfektion durch Targeting von CGAS, IRF3 und MAVS und vermittelt die Exposition von Phosphatidylserin über XKR-Familie-Scramblasen.
  Verwandte Referenzen: PMID:35338844 PMID:35446120 PMID:30878284 PMID:23845944 PMID:33725486
• Caspase-3 ist hauptsächlich im Zytoplasma lokalisiert und wird stark in Lunge, Milz, Herz, Leber und Niere exprimiert, mit moderaten Werten im Gehirn und Skelettmuskel und der höchsten Expression in Zellen des Immunsystems.
• Ihre Aktivität wird durch proteolytische Spaltung vom inaktiven Zymogen zu den aktiven p12- und p17-Untereinheiten reguliert und sie durchläuft posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung und S-Nitrosylierung.
• Die Caspase-3-vermittelte Spaltung von Huntingtin ist an der Pathologie der Huntington-Krankheit beteiligt, und sie spaltet auch Zelladhäsionsproteine wie DSG2 und JUP, um die apoptotische Zellablösung zu erleichtern.
  Verwandte Referenzen: PMID:8696339 PMID:17559062

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht der p12-Untereinheit von gespaltener Caspase-3 (Aminosäuren 171–270); daher wird erwartet, dass es die aktive gespaltene Form mit hoher Spezifität gegenüber der vollständigen Pro-Caspase-3 erkennt. Überprüfen Sie jedoch die Spezifität für den Spaltungszustand in Ihrem System.
• Für die Western-Blot-Analyse sollten Sie Apoptose-induzierte Zelllysate (z. B. Staurosporin- oder Etoposid-Behandlung) verwenden, um das gespaltene p12-Fragment nachzuweisen; optimieren Sie die Lade- und Transferbedingungen für dieses niedermolekulare Protein.
• Bei ELISA-Anwendungen kann dieser monoklonale Antikörper als Nachweisreagenz geeignet sein, wenn er mit einem Fängerantikörper gepaart wird, der eine andere Epitop erkennt; stellen Sie eine ordnungsgemäße Validierung des Antikörperpaares in Ihrem Assay sicher.
• Der Antikörper ist für humane Proben validiert; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt, bestätigen Sie daher die Reaktivität bei Verwendung mit nicht-humanen Proben.
• Als Kaninchen-monoklonaler Antikörper bietet er eine reduzierte Charge-zu-Charge-Variabilität; dennoch sollte jede neue Charge in Ihrer spezifischen Anwendung getestet werden.

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